目的:本研究旨在探讨miR-509-3-5p和PODXL在胃癌中的表达情况及其与临床病理特征的关系;应用体内、外实验研究miR-509-3-5p和PODXL在胃癌侵袭转移中的作用;应用分子生物学研究miR-509-3-5p对PODXL的调控机制。方法:首先利用miRNA芯片筛选淋巴结转移为N0和N3的胃癌组织中差异表达的miRNAs;利用q RT-PCR、ISH检测miR-509-3-5p等在胃癌组织中的表达情况;上、下调miR-509-3-5p表达后分别检测胃癌细胞株体内、外的生物学行为;利用生物信息学、q RT-PCR、Western blot、luciferase实验检测miR-509-3-5p对PODXL的调控机制;公共数据库、q RT-PCR、ISH、IHC等实验进一步阐述miR-509-3-5p与PODXL的相关性;体内实验阐述PODXL在胃癌中的作用。结果:1、miRNA芯片筛选结果显示N3组中miR-509-3-5p等信号值显著降低;qRT-PCR、ISH结果显示miR-509-3-5p在配对的胃癌组织中表达较低,且与胃癌临床病理等呈负相关性;miR-509-3-5p可以作为判断胃癌术后总体生存率的独立影响因素;TCGA数据库显示miR-509-3-5p的表达与分期呈负相关性;2、上调胃癌细胞BGC823中miR-509-3-5p的表达后,可以减弱胃癌细胞的克隆形成、迁移和侵袭能力,下调胃癌细胞MGC803中miR-509-3-5p的表达后,可以增强胃癌细胞的克隆形成、迁移和侵袭能力;体内实验证实敲减胃癌细胞MGC803中miR-509-3-5p的表达后,可以促进裸鼠体内肿瘤生长和淋巴结转移;3、生物信息学、q RT-PCR、Western blot、luciferase实验结果显示miR-509-3-5p可以靶向调控PODXL的表达;q RT-PCR、ISH、IHC等实验结果进一步提示miR-509-3-5p与PODXL的负向调控关系;4、IHC与公共数据库结果显示PODXL在胃癌组织中高表达,且与胃癌临床病理特征呈正相关。上调胃癌细胞BGC823中PODXL的表达后,可增强胃癌细胞克隆形成、迁移和侵袭能力,下调胃癌细胞MGC803中PODXL的表达后,可减弱胃癌细胞克隆形成、迁移和侵袭能力。结论:MiR-509-3-5p可以通过负向调控PODXL,抑制胃癌的侵袭和淋巴结转移。MiR-509-3-5p/PODXL通路的发现可能为胃癌淋巴结转移的诊断和预后判断提供新的分子标记物。