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目的:
初步建立凡纳滨对虾(虾)弧菌病的诊断图谱,阐明中药复方KHZ体内外防治弧菌病的临床效果及对虾体内免疫酶活性的影响,为开发能有效防治弧菌病的中药新药提供参考。
方法:
①测量弧菌菌落数目与吸光度的关系,建立菌悬液中弧菌计数方法。利用纸片扩散法和微量肉汤稀释方法,以中药复方KHZ对副溶血弧菌、创伤弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌4种常见致病弧菌产生的抑菌环直径、最低抑菌浓度和最低杀菌浓度为指标,确定中药复方KHZ体外抑菌效果。
②建立弧菌病的诊断图谱,拍摄不同弧菌病症状的虾图片,分成体表、解剖、虾塘进行描述和诊断。
③开展中药复方KHZ急性毒性实验。设置实验组、空白组,比较不同给药剂量,统计虾每天的死亡数量和存活数量。
④进行中药复方KHZ治疗弧菌病的临床效果研究。通过体表、解剖、体内弧菌量检查、判断对虾的治疗效果,比较咸淡水、海水养殖不同养殖环境对药效的影响。
⑤分别设置感染发病给药组、感染发病对照组和正常组,对比影响虾免疫功能的四个酶:酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、溶菌酶、谷丙转氨酶,在96h实验期内的变化及其变化规律。
结果:
中药复方KHZ对4种不同种类的弧菌均有较好的抑制杀灭作用,抑菌环直径均大于18mm,属于高度敏感;最低抑菌、最低杀菌浓度均为0.325~0.651mg/mL。对感染弧菌的虾、拍摄弧菌病症状的虾图片,分成体表、解剖、虾塘诊断,分析总结病虾的症状具有多种弧菌共同感染的特点。急性毒性试验,中药复方KHZ未见因药物引起虾死亡,虾体重(4.5±0.35)g、测定最大药物剂量达到3.6g/100尾,临床用药安全性较高。对比咸淡水、海水养殖临床用药效果,可知中药复方KHZ一次用药抑杀体内弧菌,一次用药就能见效,两天治愈弧菌病。中药复方KHZ有升高酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、溶菌酶活性的效果,稳定谷丙转氨酶活性的作用,增强虾免疫力的效果。
结论:
中药复方KHZ临床试验表明了其对弧菌病治愈率达100%,同时具有增强虾免疫作用,为开发出防治弧菌病安全有效的新产品提供实验依据。
初步建立凡纳滨对虾(虾)弧菌病的诊断图谱,阐明中药复方KHZ体内外防治弧菌病的临床效果及对虾体内免疫酶活性的影响,为开发能有效防治弧菌病的中药新药提供参考。
方法:
①测量弧菌菌落数目与吸光度的关系,建立菌悬液中弧菌计数方法。利用纸片扩散法和微量肉汤稀释方法,以中药复方KHZ对副溶血弧菌、创伤弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌4种常见致病弧菌产生的抑菌环直径、最低抑菌浓度和最低杀菌浓度为指标,确定中药复方KHZ体外抑菌效果。
②建立弧菌病的诊断图谱,拍摄不同弧菌病症状的虾图片,分成体表、解剖、虾塘进行描述和诊断。
③开展中药复方KHZ急性毒性实验。设置实验组、空白组,比较不同给药剂量,统计虾每天的死亡数量和存活数量。
④进行中药复方KHZ治疗弧菌病的临床效果研究。通过体表、解剖、体内弧菌量检查、判断对虾的治疗效果,比较咸淡水、海水养殖不同养殖环境对药效的影响。
⑤分别设置感染发病给药组、感染发病对照组和正常组,对比影响虾免疫功能的四个酶:酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、溶菌酶、谷丙转氨酶,在96h实验期内的变化及其变化规律。
结果:
中药复方KHZ对4种不同种类的弧菌均有较好的抑制杀灭作用,抑菌环直径均大于18mm,属于高度敏感;最低抑菌、最低杀菌浓度均为0.325~0.651mg/mL。对感染弧菌的虾、拍摄弧菌病症状的虾图片,分成体表、解剖、虾塘诊断,分析总结病虾的症状具有多种弧菌共同感染的特点。急性毒性试验,中药复方KHZ未见因药物引起虾死亡,虾体重(4.5±0.35)g、测定最大药物剂量达到3.6g/100尾,临床用药安全性较高。对比咸淡水、海水养殖临床用药效果,可知中药复方KHZ一次用药抑杀体内弧菌,一次用药就能见效,两天治愈弧菌病。中药复方KHZ有升高酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、溶菌酶活性的效果,稳定谷丙转氨酶活性的作用,增强虾免疫力的效果。
结论:
中药复方KHZ临床试验表明了其对弧菌病治愈率达100%,同时具有增强虾免疫作用,为开发出防治弧菌病安全有效的新产品提供实验依据。