腐烂茎线虫中国新寄主种群记述及其LAMP快速检测方法研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:binaryaa
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
茎线虫属(Ditylenchus Filipjev,1936)是植物上的一类重要病原生物,也是分类上最难鉴定的属之一,其中腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)能对多种农作物造成严重危害,是许多国家和地区的检疫性线虫。本文利用形态学和分子生物学特征相结合的方法对从胡萝卜中分离出的茎线虫进行了种类鉴定,并建立了基于28S rRNA序列利用环介导恒温扩增技术对其进行快速检测的技术,具体研究结果如下。1、本文首次记述了中国胡萝卜上的腐烂茎线虫。从胡萝卜中分离出的茎线虫主要形态学鉴定特征为:体长=896.3-1122.3μm;a=30.9-41.5μm;b=7.1-10.4μm;c=12.1-16μm;c`=3.4-4.8μm;v=79.3-82.3μm;口针长=9.7-11μm,与已报道的腐烂茎线虫测量值均有交叠;通过分子生物学方法得到其ITS和28S D2-D3扩展区序列,分别为916bp和779bp,经过在线比对,发现与已报道的中国甘薯上D.destructor ITS序列(EF208210)和28S D2-D3扩展区序列(EU400636)的相似性均为99%,因此被确认为腐烂茎线虫。2、建立了腐烂茎线虫LAMP快速检测鉴定方法。该方法使用的LAMP特异引物是基于腐烂茎线虫28S D2-D3扩展区序列设计的,包括DdBIP、DdFIP、DdF3、DdB3和DdLF;LAMP优化反应体系为Mg2+的浓度6.0 mmol·L-1、dNTPs的浓度为0.8mmol·L-1、Bst 2.0聚合酶的浓度为0.2 U·μL-1、反应温度65℃、反应时间为50 min;分别采用凝胶电泳和SYBR GreenⅠ染料检测LAMP反应结果。3、对建立的腐烂茎线虫检测技术使用凝胶电泳和SYBR GreenⅠ染料目测检测法进行了特异性、灵敏性和稳定性研究。结果表明该检测方法可以稳定的检测到来自不同虫态(雌虫、雄虫、幼虫或卵)的个体,不同寄主和地区的腐烂茎线虫种群,还可以从多种线虫混合的样品、植物组织样品和土壤样品中直接检测出腐烂茎线虫,检测灵敏度达到1/1000条虫DNA。本研究为我国加强胡萝卜线虫病害的监测和防控提供了依据,为口岸和调运检疫以及田间调查监测中腐烂茎线虫的快速检测鉴定提供了新的有效方法,对防止腐烂茎线虫扩散传播酿成更大灾害具有重要意义。
其他文献
为应对全球能源供需矛盾、减少环境污染和降低碳排放,世界各国相继推进能源结构转型,大力发展绿色清洁的可再生能源。在世界能源消费总量中,生物质是仅次于煤炭、石油、天然
随着社会的发展,传统化学制造业存在的高消耗、低产出、高排放等问题对人类的生存环境产生不可逆性的破坏,使各国的经济和自然环境遭到了前所未有的挑战,绿色化学概念成为化
拟禾本科根结线虫(Meloidogyne graminicola)是水稻上重要的病原线虫之一,每年给水稻产业造成极大的损失,通过构建in planta RNAi转基因水稻,能有效抵抗拟禾本科根结线虫的侵
弱凝胶调剖作为一项深部调驱技术,优势在于其溶解速度快、成本低、配注工艺简单、流动性强,且具有良好的抗剪切性能。本文针对海上垦利油田,筛选出一种新型乳液型聚合物交联
氢能被视为21世纪最具发展潜力的清洁能源。但是氢气容易泄露、密度小、易燃易爆,使得它难于储存和运输,极大地制约了氢能产业的发展。解决储/运氢问题的有效途径之一是开发一种运输方便,制氢效率高,清洁环保的制氢材料作为移动氢源。利用铝或铝基复合材料与水反应产氢的性质,实现按需实时制氢被认为是一种很有前景的技术。本文采用机械球磨法,选用价格低廉的金属铋和氯化钠作为活性剂,制备出了一系列铝基产氢材料。系统研
量子Yang-Baxter方程是数学物理中的一个基本方程,并且是量子群理论的基础.Drinfeld在1992年提出研究Yang-Baxter方程集论解.即,在一个非空集合X上构造满足下面的辫关系的映射S:X×X→X×X:S12S23S12=S23S12S23,其中S12=S×idX,S23=idX×S.1999年,Etingof等人系统地研究了Yang-Baxter方程的非退化对合集论解.他们提出
随着时代的进步,人们的生活水平不断的提高,生活方式也随之多样化。随着人们生活方式多样化,移动通信技术也加快了发展的脚步以满足人们的生活需求。因此如何有效的优化通信网络保障通信质量成为了关键问题。在高话务场景下,短时间内大规模的用户同时发起寻呼接入,用户在同一时间集中使用数据业务进行短视频和照片等内容的分享,导致无线接通率下降、传输速率降低、噪音提升等一系列指标的恶化,由此使用户无法正常使用移动网络
大气污染防治是我国环境保护工作的重点,是为人民创造良好生产生活环境的关键。甲醛、二氧化氮等气体严重危害人类健康,气体传感器具有及时、快速、灵敏等特点,已成为大气污染检测与防治领域的研究热点。尽管半导体气敏传感器在生产生活各个领域获得了广泛应用,但长期的研究与应用也表明该类半导体传感器仍然存在一些亟待于解决的关键问题:(1)敏感材料种类繁多,相应的感应机制比较复杂,有待于进一步探明;(2)受限于半导
蛋白质的可逆磷酸化修饰在生物体内有着重要的作用,作为蛋白质磷酸化修饰当中的一种,N-磷酸化修饰因为遇酸易水解、天然丰度低以及缺乏有效的研究工具等一些特殊原因而常常被人们所忽略。基于此,本论文建立了以表面修饰金纳米粒子的磁性材料(Fe3O4@Si02@Au)作为pArg抗体固载工具来研究N-磷酸化修饰中的一种——精氨酸磷酸化的方法。首先,将纯化得到的pArg抗体固载到Fe3O4@SiO2@Au材料上
TTT公司目前存在着新产品开发成功率严重偏低的问题,亟待解决。本论文通过对TTT公司新产品开发流程的探索,对现行的流程存在的问题进行了分析,然后决定从哪些方面和如何调整现有的流程。首先市场需求的改变决定着我们应该做什么样的产品,因此产品开发要以市场的调查为前提,而且要尽量让调查更贴近于真实。其次科学技术的发展和先进技术的应用往往能改变产品设计过程中的某些环节,进而改变流程。最后产品开发流程与产品开