【摘 要】
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目的:通过体外实验观察低氧对慢性粒细胞白血病K562细胞血管生成因子mRNA表达及培养上清中血管因子的浓度和HIF-1α的关系,探讨低氧通过HIF-1α对慢性粒细胞白血病血管因子生成的调节作用,从而丰富低氧条件下慢性粒细胞白血病血管生成调节的基础理论研究。方法:选取K562细胞作为实验对象,将K562细胞用HIF-1α干扰的Lentivirus病毒液转染,倒置免疫荧光显微镜观察转染情况,转染后K5
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目的:通过体外实验观察低氧对慢性粒细胞白血病K562细胞血管生成因子mRNA表达及培养上清中血管因子的浓度和HIF-1α的关系,探讨低氧通过HIF-1α对慢性粒细胞白血病血管因子生成的调节作用,从而丰富低氧条件下慢性粒细胞白血病血管生成调节的基础理论研究。方法:选取K562细胞作为实验对象,将K562细胞用HIF-1α干扰的Lentivirus病毒液转染,倒置免疫荧光显微镜观察转染情况,转染后K562细胞经过低氧培养作为低氧干扰组,空载病毒的K562细胞分别经常氧及低氧培养后作为常氧组和低氧组。通过上述处理收集细胞和培养上清,提取细胞RNA,用RT-PCR检测HIF-1α、VEGF、Ang-I、Ang-II、TGF-α、TGF-βmRNA表达;培养上清经ELISA检测上清VEGF、Ang-I、Ang-II、TGF-α、TGF-β浓度。结果:低氧组VEGF、Ang-II、TGF-αmRNA水平较常氧组升高,而TGF-βmRNA水平常氧组高于低氧组,培养上清中TGF-α未检测到,VEGF、ANG-II浓度低氧组高于常氧组,而TGF-β浓度常氧组高于低氧组,差异具有统计学意义(P<0.05);低氧组VEGF、Ang-II、TGF-αmRNA表达高于低氧干扰组,而TGF-βmRNA表达低氧干扰组明显高于低氧组,上清中TGF-α未检测到,VEGF、ANG-II、TGF-β浓度低氧组高于低氧干扰组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.HIF-1αmRNA可能正向调控K562细胞中VEGF、Ang-II、TGF-αmRNA的表达并促进VEGF、Ang-II自分泌能力;2.HIF-1αmRNA抑制TGF-βmRNA的表达,但促进其自分泌水平;3.低氧通过HIF-1α对K562细胞各血管生成因子mRNA表达和自分泌的影响不完全相同。
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