背景环状RNA（Circular RNA,Circ RNA）是一种不具有3’端、5’端及poly A尾的单链闭合环状非编码RNA。因为其封闭式环状结构使其不那么容易被核酸外切酶分解,所以Circ RNA比线性RNA更稳定。研究表明,环状RNA在多种肿瘤中存在异常表达,并与多种非肿瘤性疾病相关,例如糖尿病、心脑血管疾病等。正是由于环状RNA在多种疾病中的异常表达及其对疾病发生发展的调控,环状RNA已成为多种疾病的生物标志物和治疗靶点。然而,环状RNA在肿瘤中的功能和机制大部分仍然是未知的。本课题阐明环状RNA CircEMB＿003（又叫circ＿0001481）在人结直肠癌中的表达及其在结直肠癌增殖和迁移中的作用。目的检测CircEMB＿003在结直肠癌中的表达,明确CircEMB＿003对结直肠癌细胞生物学行为的影响,以期为临床基因治疗结直肠癌提供新的策略。方法1.通过PCR扩增、Sanger测序、RNA酶R消化以及放线菌素D处理等实验对CircEMB＿003进行鉴定。2.Real-time q PCR检测CircEMB＿003在结直肠癌组织及结直肠癌细胞株中的表达;利用受试者工作特征曲线（ROC曲线）判断CircEMB＿003的诊断价值。3.慢病毒包装体系构建结直肠癌细胞系过表达CircEMB＿003稳定株。4.CCK8细胞增殖实验、平板克隆形成实验检测CircEMB＿003对结直肠癌细胞HCT116、LOVO增殖的影响。5.Transwell迁移实验、划痕愈合实验检测CircEMB＿003对结直肠癌细胞HCT116、LOVO迁移能力的影响。6.通过裸鼠皮下成瘤实验检测CircEMB＿003对结直肠癌细胞体内增殖能力的影响,并利用免疫组织化学实验检测CircEMB＿003过表达之后对增殖标志物Ki67表达的影响。结果1.PCR、琼脂糖凝胶电泳及Sanger测序等实验证实CircEMB＿003是由背向剪切形成的闭合环状RNA,其性质稳定,能够耐受核酸外切酶的降解。2.qRT-PCR结果显示,与癌旁相对正常肠黏膜组织及肠上皮细胞NCM460相比,CircEMB＿003在结直肠癌组织及细胞中的表达显著降低。差异具有统计学意义（P＜0.05）。ROC曲线结果显示,CircEMB＿003具有诊断价值。3.CCK8细胞增殖实验及平板克隆形成实验结果显示,CircEMB＿003过表达可以抑制结直肠癌细胞HCT116、LOVO的增殖。差异具有统计学意义（P＜0.05）。4.Transwell细胞迁移实验、划痕愈合实验结果显示,CircEMB＿003过表达可以抑制结直肠癌细胞HCT116、LOVO迁移。差异具有统计学意义（P＜0.05）。5.裸鼠皮下成瘤实验显示,CircEMB＿003过表达可以抑制结直肠癌细胞体内生长。差异具有统计学意义（P＜0.05）。免疫组织化学Ki67染色结果也显示,CircEMB＿003过表达之后Ki67阳性指数降低,提示CircEMB＿003抑制结直肠癌体内增殖。结论CircEMB＿003是由背向剪切形成的闭合环状RNA,其在结直肠癌中低表达;过表达CircEMB＿003可以抑制结直肠癌细胞的体内外增殖及体外迁移。