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研究背景颈椎间盘退变是伴随着年龄增长的一种生理病理现象,但现代社会人们工作和生活方式的改变、人口老龄化加重,颈椎病的发病率逐步增高,成为临床常见病和多发病之一。颈椎MRI检查在临床已普及,一方面,颈椎MRI检查可作为临床医生对病情的判断和选择恰当的治疗方案的参考,另一方面颈椎MRI可检测早期的椎间盘退变,具有较高的科研价值。利用MRI检测椎间盘退变,可以无创性地评估椎间髓核退变程度,无电离辐射,对人体的生理状态无影响,MRI的软组织对比度高,不仅可以观察椎间盘的组织结构,显示椎间盘本身及周围神经根、椎管的病变,还可以对椎间盘的生化改变作出评估。MRI能够清楚地显示髓核内部的脱水改变,主要表现为T2相椎间盘内信号降低,目前有少量的分类标准或分级能间接地体现椎间盘组织及退变的程度,但都存在一定的不足。椎间盘退变是导致椎间盘突出以及许多脊柱疾病的病理基础,椎间盘退变的主要表现包括:椎间盘髓核细胞数量减少和功能降低及细胞外基质生化成分发生改变,如蛋白聚糖、Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)等基质大分子的减少,导致椎间盘应力改变、椎间高度的丢失,最终导致生物力学功能的丧失。一些研究已经证明了 CTGF/CCN2、BMP-2、BMP-7在椎间盘中对细胞外基质的合成具有重要作用,并且发现从椎间盘发育的早期至椎间盘退变的过程中CTGF/CCN2、BMP-2、BMP-7均有参与表达。近年的研究显示,CTGF/CCN2、BMP-2、BMP-7在退变椎间盘中表达增高,并且研究发现CTGF/CCN2、BMP-2、BMP-7在退变的过程中具有重要作用。研究目的目前关于颈椎间盘退变的影像学分级很少,而将影像学与其病理学相结合来评价椎间盘的退变的程度则更少。观察比较颈椎间盘MRI的Miyazaki分级与退变的颈椎间盘生化指标BMP-2、BMP-7、CTGF的相关性进行研究,判断颈椎间盘退变过程中退变程度的不同反应在分子内部与影像学的关系,以期在临床通过颈椎MRI评价椎间盘退变的程度,为目前的椎间盘生物治疗的研究提供一个相对可靠的时机。研究方法1.行颈椎前路患者术前常规于我院行颈椎1.5T MRI检查,选择患者T2加权像的颈椎矢状位、横断位影像,使用颈椎间盘MRI表现的退变评价系统进行责任节段椎间盘退变程度分级,分级系统使用Miyazaki分级系统(表1),每个患者责任节段MRI分级由我科包括主刀医生在内的3名副主任以上医师进行评定,并进行拍照记录。2.由同一主刀医生行颈椎前路手术,术中收集患者2-3个节段椎间盘,一次性取出椎间盘前方髓核和中间髓核部分,采集椎间盘后使用生理盐水洗净血渍,立即置入福尔马林固定液(浓度为10%)中进行组织固定。实验中所需用到的玻璃器皿及器械均在实验前一日置180 ℃高温烘烤6小时已达到消除RNA酶的目的,在进行石蜡包埋、切片后,分别进行组织的HE染色、BMP-2免疫组化染色、BMP-7免组化染色、CTGF免疫组化染色。研究结果BMP-2、BMP-7、CTGF三个不同指标的免疫组化结果与颈椎间盘MRI分级以及与不同颈椎节段的相关性各有不同。在BMP-2免疫组化指标中,累积光密度(IDO)与颈椎间盘MRI分级表现出正相关性(P<0.05);在不同的责任节段颈椎间盘(本实验主要取C4-5、5-6、6-7)中,累积光密度(IOD)与节段之间变现出正相关性(P<0.05);细胞核计数(Samples)与颈椎间盘MRI分级、节段之间都变现出正相关性(P<0.05)。累积光密度(IDO)、细胞核计数(Samples)与颈椎间盘MRI分级的散点图中都表现出一定上升的趋势。在实验BMP-7免疫组化指标中,累积光密度(IDO)、细胞核计数(Samples)、平均光密度(Density(mean))与颈椎间盘MRI分级及颈椎节段之间均未表现出相关性,但在散点图中,BMP-7的累积光密度(IDO)、细胞核计数(Samples)、平均光密度(Density(mean))与颈椎间盘MRI分级之间表现出一定上升的趋势。在实验CTGF免疫组化指标中,累积光密度(IDO)、平均光密度(Density(mean))与颈椎间盘MRI分级未表现出相关性,累积光密度(IDO)与不同颈椎节段之间表现出负相关性(相关系数为-0.440,P<0.05),但在散点图中CTGF累积光密度(IDO)与颈椎间盘MRI分级之间则表现出一定下降趋势。结论1.颈椎MRI的Miyazaki分级系统可以很好的判断颈椎间盘退变程度,并对颈椎间盘的退变程度进行分级。2.颈椎MRI的Miyazaki分级与BMP-2存在一定的正相关性,在生理状态下BMP-2随着椎间盘退变程度的加重其含量升高。3.颈椎MRI的Miyazaki分级与BMP-7无相关性,但随着椎间盘退变程度的加重,BMP-7的含量存在一定上升的趋势。4.颈椎MRI的Miyazaki分级与CTGF无相关性,但随着椎间盘退变程度的加重,CTGF的含量存在一定下降的趋势。