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茶叶是一种富含茶多酚的植物,多酚总量占到了茶叶干重的18%～36%。茶叶中多酚包括儿茶素、黄酮及其苷类、花青素和花白素以及酚酸和缩酚酸等,而其中儿茶素占到多酚总量的70%左右。儿茶素不仅仅对茶叶的滋味具有重要的作用,而且大量的研究表明儿茶素还具有重要的生物活性,在抗氧化、清除楚自由基、抗菌消炎、抗病毒,预防心血管疾病、降血压血脂和预防癌症等方面其中重要的功能。由于儿茶素主要组分结构和物理化学性质比较相似,有效的分离各儿茶素单体有一定的难度。伴随着儿茶素药理功能研究的不断深入,儿茶素单体分离制备的研究显得更为突出,因此探寻一种简单易行、成本低廉的儿茶素单体制备方法具有重要的现实意义。本文在查阅了国内外大量文献基础上,研究了从绿茶中分离制备儿茶素单体的方法。具体研究内容如下:1本论文通过查阅大量文献,对目前国内外已有的分离制备儿茶素单体方法展开综述。分析比较了硅胶柱层析、凝胶柱层析、高速逆流色谱、制备液相、吸附柱层析以及多种方法联用的优缺点。制备液相和高速逆流色谱制备纯度高,但是制备量小;柱层析制备量大但是产品纯度低,需要后续进一步的纯化。此外论文也对茶叶中槲皮素也进行了综述讨论。2.试验以市场随机购买绿茶为原料,提取分离制备茶多酚。分析比较绿茶原料的理化指标和制得多酚的纯度。选取6个茶样中多酚含量范围为15.02～24.89 mg GAE?g-1之间。6种绿茶多酚提取得率为5.32%～12.02%,多酚纯度为63.48到69.08 mg GAE?g-1之间。所得多酚中四种主要的表儿茶素EC、EGC、ECG和EGCG的平均含量依次为6.00%、11.22%、9.17%和37.32%。3.以95%的乙醇为洗脱溶剂,通过Sephedex LH-20柱层析对茶多酚进行粗分离得到EC、EGC、ECG和EGCG粗品,粗品纯度依次为78.16%、78.26%、88.83%和92.33%。其后采用结晶的方法对EC、EGC、EGCG粗品进行纯化,得到的产品其纯度依次为97.28%、98.14%和99.12%;对ECG粗品采取柱层析分离方法纯化,得到纯度为93.34%的ECG产品。纯化过程中EC、EGC、ECG和EGCG的得率分别为59.62%、50.78%、61.89%和59.61%。4.本试验在研究分离制备儿茶素单体同时,可以分离制备纯度达到98%以上的槲皮素。试验突破了以往先水解芦丁得到槲皮素的方法,为槲皮素的分离制备提供了一种新的方法参考;此外从茶叶中分离制备槲皮素的报道较少,本文茶叶为原料,对于如何充分开发和利用茶叶资源提供一条途径。5.最后论文对分离制备的儿茶素和槲皮素单体进行了波长扫描、1H-NMR和13C-NMR检测分析。从而确证了所得的产品为相应单体。