BRD4抑制剂对肝细胞癌细胞Huh7增殖、侵袭和凋亡的影响

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目的:原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC),通常被称为肝癌,在中国是高发的癌症。全球每年患病大约60万人中的25万人死于肝癌,我国占其中的45%,发病率、病死率在癌症中分别位于第五位,第三位。中年男性多发此病,且患病率男女之比为5∶1。在这之中90%为肝细胞型肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC),HCC已经成为严重威胁我国人民生命健康的恶性肿瘤之一。肝癌的癌变是由肿瘤抑制基因的失活、致癌基因的激活等变化所引起。肝癌死亡率高往往是因转移和复发所造成。因此为了提高疗效,改善预后,提高生存率,研究肝癌的转移和复发对于寻找药物治疗靶点具有重要意义。溴结构域蛋白4(Bromodomain-containing protein 4,BRD4)是溴结构域和超末端结构家族成员,在细胞周期中能够与乙酰化的组蛋白相结合。BRD4调节靶基因的表达是通过招募不同的转录调节因子来实现的。其发挥的重要作用是通过调节细胞周期、细胞基因转录、及炎症等生物过程所完成的。有实验证实,如鼻咽癌、乳腺癌、急性淋巴细胞白血病等癌症的发生与进展都有BRD4的表达水平失调的参与。目前,BRD4抑制剂对原发性肝癌的作用报道甚少,需要更多研究来探索其详尽的功能。本研究将通过相关实验采用BRD4抑制剂处理肝癌细胞,观察其对肝癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。研究方法:用BRD4抑制剂GSK525762A抑制肝癌细胞系Huh7细胞BRD4活性。GSK525762A处理Huh7细胞48、72h后,通过CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;GSK525762A处理Huh7细胞48、72h后,通过Transwell法检测Huh7细胞的侵袭能力;GSK525762A处理Huh7细胞48、72h后,采用流式细胞术FITC染色法检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:GSK525762A可以抑制Huh7细胞的增殖,且增殖抑制率随时间和浓度增加而升高,差异有统计学意义(p﹤0.05);经GSK525762A处理后的细胞侵袭能力小于空白对照,且随时间的增加而降低,差异有统计学意义(p﹤0.05);细胞早期、晚期及总凋亡率经GSK525762A处理后均升高,且高于空白对照组,并呈时间依赖性,差异有统计学意义(p﹤0.05)。结论:我们的研究发现BRD4抑制剂GSK525762A可抑制肝癌细胞Huh7细胞的增殖,降低其侵袭能力并诱导Huh7细胞凋亡。
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