针刺“肺俞”穴对肺免疫炎症大鼠IL-4、IL-6、IFN-γ和ACTH影响的研究

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目的:本实验通过卵蛋白(OVA)诱导激发建立支气管哮喘大鼠模型,然后针刺支气管哮喘大鼠的“肺俞”穴,观察哮喘的症状、及大鼠的肺泡灌洗液(BALF)和血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)及肺组织中IL-6和血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)含量的表达,评价针刺“肺俞”穴通过调节神经免疫内分泌系统对支气管哮喘大鼠机体炎症反应的影响,进一步探讨针刺“肺俞”穴对IL-4、IL-6、IFN-γ、ACTH的干预作用。材料和方法:根据随机数字表,将40只200g左右的雄性Wistar大鼠随机平均分为4组(每组10只),正常对照组(在第0、7、14、21天,腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS),第22天到43天雾化吸入1%氯化钠(NaCl),每次20分钟);模型组(在第0、7、14、21天,腹腔注射含OVA 1 mg+氢氧化铝(AL(OH)3)200 mg的1 mL的PBS,第22天到43天,雾化吸入1%OVA NaCl溶液20分钟,诱导激发哮喘。);“肺俞”穴组(针刺“肺俞”3-5mm,留针20分钟,强度适中,没有躯体扭动为度。隔日一次,连续21天);非经非穴组(针刺“肺俞”旁开0.5cm处肩胛骨上,留针20分钟,隔日一次,连续21天)。治疗结束后,收集大鼠肺泡灌洗液、血清、肺组织,用Elisa法检测肺泡灌洗液中的IL-4、IFN-γ、IL-6的含量,检测血清中IL-4、IFN-γ、IL-6、ACTH的含量,检测肺组织中IL-6的含量。用瑞士-吉姆萨染色法检测肺泡灌洗液中炎性因子及嗜酸性粒细胞(EOS)细胞的含量。用HE染色法,观察肺组织的病理变化。数据采用SPSS19.0统计软件进行单因素方差分析,组间比较采用LSD法分析,结果以均数±标准差(x±s)表示,p<0.05表示差异具有统计学意义。结果:1肺组织和气管形态变化正常组:上皮细胞排列整齐,形态规则,管腔内无分泌物,肺泡正常,管壁和平滑肌无增生。哮喘组织:上皮细胞排列不整齐,肺泡管明显扩张,管壁粘膜明显水肿,分泌物增多,支气管壁EOS浸润现象,管壁增厚。“肺俞”穴组:上皮细胞略微整齐,粘膜有脱落,管壁及平滑肌稍有增生,EOS浸润明显减少。非经非穴组:与模型组相比改变不明显。2 BALF中炎性细胞总数和EOS总数与模型组比较,“肺俞”穴组炎性细胞总数与EOS总数明显降低(P<0.05),非经非穴组炎性细胞总数和EOS总数明显降低(P<0.05);与正常组比较,模型组炎性细胞总数与EOS总数明显升高(P<0.05),“肺俞”穴组炎性细胞总数与EOS总数明显升高(P<0.05);非经非穴组炎性细胞总数与EOS总数明显升高(P<0.05)。3针刺“肺俞”穴对IL-4的影响与正常组比较,模型组IL-4含量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,“肺俞”穴组IL-4含量显著降低(P<0.05);与模型组相比,非经非穴组IL-4含量无显著差异(P>0.05);与“肺俞”穴组比,非经非穴组血清中IL-4含量要显著增高(P<0.05)。4针刺“肺俞”穴对IL-6的影响与正常组比较,模型组IL-6含量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,“肺俞”穴组IL-6含量显著降低(P<0.05),非经非穴组IL-6含量与模型组相比无显著差异(P>0.05)。5针刺“肺俞”穴对IFN-γ的影响与正常组比较,模型组IFN-γ含量均显著降低(P<0.05);与模型组比较,“肺俞”穴组IFN-γ含量显著升高(P<0.05);非经非穴组IFN-γ含量与模型组相比无显著差异(P>0.05);与“肺俞”穴组比较,非经非穴组血清中IFN-γ含量要显著降低(P<0.05)。6针刺“肺俞”穴对ACTH的影响与正常组比较,模型组ACTH含量显著降低(P<0.05);与模型组比较,“肺俞”穴组ACTH含量显著升高(P<0.05),非经非穴组ACTH含量无显著差异(P>0.05)。结论:1针刺“肺俞”穴可降低肺免疫炎症大鼠BALF中炎症细胞总数和EOS总数。2针刺“肺俞”穴可降低大鼠BALF和血清中IL-4含量。3针刺“肺俞”穴可降低大鼠BALF和血清及肺组织中IL-6含量。4针刺“肺俞”穴可升高大鼠BALF和血清中IFN-γ含量。5针刺“肺俞”穴可升高大鼠血清中ACTH含量。
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