应用载体介导的RNAi技术抑制IL-1β诱导的人支气管上皮细胞COX-2

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  本文应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定IL-1β、IL-1β和人COX-2特异siRNA质粒联合干预后人支气管上皮细胞COX-2mRNA表达相对量及合成PGE2浓度的变化,测定不同浓度和不同时间的白细胞介素1β(IL-1β)诱导的人支气管上皮细胞(HBEC)产生环氧合酶2(COX-2)mRNA相对量和前列腺素E2(PGE2)的浓度,探讨COX-2和PGE2与气道炎症的相关性;并用载体介导的RNA干扰(RNAi)技术特异性干扰COX-2mRNA在人支气管上皮细胞中的表达,探讨载体介导的RNAi技术的特异性、高效性和稳定性。研究结论:IL-1β诱导HBEC表达COX-2mRNA和合成PGE2呈时间和浓度依赖性;载体介导的RNAi能够高效,特异的干扰IL-1β诱导COX-2在HBEC中的表达。
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本研究基于上述免疫学和分子生物学的研究结果以及IL-1ra临床应用需解决的问题,拟构建可在真核细胞表达IL1-ra的重组质粒,尝试IL-1ra基因原位转染对角膜碱烧伤和角膜移植排斥反