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本研究以具有香味的优良香稻品种京香1号和京香2号与非香稻品种宁粳28号、宁粳38号、宁粳40号、花94、吉粳105和田丰302为亲本,分别配制杂种F1,自交后构建宁粳28号/京香1号、京香1号/花94、田丰302/京香1号、京香2号/宁粳40号、京香2号/宁粳38号、吉粳105/京香2号等6个杂交组合的F2群体,用KOH浸泡法鉴定亲本、杂交F1和F2代群体中单株叶片的香味,统计各世代的香味与非香味植株数,进行水稻香味性状的遗传分析;同时以均匀分布于水稻12条染色体上的208对SSR引物,对香稻亲本与非香稻亲本进行多态性筛选,构建香味基因池与非香味基因池,用亲本间有多态性的SSR引物对香味池与非香味池进行筛选,用筛选到的与香味基因连锁的SSR引物对4个杂交F2群体进行PCR扩增,通过统计分析,对水稻香味基因进行定位研究。结果如下:
1.京香1号与3个无香味的水稻品种配制杂交组合,构建杂交F1和F2群体,3个杂交组合的F1植株叶片均无香味,其中宁粳28号/京香1号、田丰302/京香1号2个组合的F2代群体单株无香味植株与有香味植株符合3:1的分离比,表明京香1号的香味性状是由1对等位基因控制,有香为隐性,无香为显性;京香1号/花94组合的F2代群体单株无香味植株与有香味植株的分离比例符合9:7,表明香味性状由2对基因控制,有香为隐性,无香为显性。
2.京香2号与3个非香稻品种配制杂交组合,构建杂交F1和F2群体,3个杂交组合的F1植株叶片均无香味,3个杂交组合的F2代群体单株叶片无香味檀株与有香味植株符合3:1的分离比,表明京香2号的香味性状也受1对等位基因控制,有香为隐性,无香为显性。
3.利用京香2号/宁粳38号韵F2代群体对京香2号的香味基因进行初步定位。将京香2号的隐性香味基因JX2(t)初步定位于水稻第8号染色体上,位于SSR标记RM339和RM6948之间,与两个标记间的遗传距离分别为13.6cM和9.4cM。两侧连锁相对紧密的SSR标记还有RM7338,RM6845,RM7和RM163。
4.利用宁粳28号/京香1号、田丰302/京香1号、京香1号/花94的F2代群体对京香1号的香味基因进行初步定位。将京香1号的隐性香味基因JX1(t)初步定位于水稻第8号染色体上,在宁粳28号/京香1号组合中隐性香味基因JX1(t-1)与SSR标记RM515和RM6948的遗传距离分别为10.1cM和23.2cM。在田丰302/京香1号组合中隐性香味基因JX1(t-2)与SSR标记RM515的遗传距离为6.8 cM;在京香1号/花94组合中隐性香味基因JX1(t-3)与SSR标记RM6948的遗传距离为7.6cM。