枸杞叶多糖LBLP5-A的分离纯化与结构解析

来源 :西北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hu_20092009
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枸杞属茄科草本植物,是一种传统的药食两用植物,其果实、叶、根均可入药。在《本草纲目》和《历代本草》中均记载,杞叶又称天精草,具有强身健体、祛风湿、生津解渴、抗氧化、增强视力的功效。多糖是枸杞叶重要的活性成分。本研究以枸杞叶为材料,提取和分离纯化出LBLP5-A,并对LBLP5-A的理化性质、结构和体外抗氧化活性进行了研究,结果如下:1.枸杞叶多糖LBLP5-A的提取、分离纯化和理化性质的研究通过热水提取、乙醇沉淀得到枸杞叶粗多糖LBLP。采用DEAE-纤维素柱和SephadexG-100凝胶柱对粗多糖进行分离和纯化,得到LBLP5-A,并用UV、HPLC、GC、IR等仪器手段研究LBLP5-A的理化性质。结果表明:LBLP5-A具有均一性且分子量为1.13×105 Da;其糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖,相对摩尔比为0.5:1.9:1.0;糖含量为93.71%;蛋白含量为4.60%。2.枸杞叶多糖LBLP5-A的结构解析通过还原性p-消除反应发现LBLP5-A为O-连接的糖复合物,释放LBLP5-A的糖链得到LBLP5-A-OL1, LBLP5-A-OL2, LBLP5-A-OL3, LBLP5-A-OL4四个组分。采用单糖组成分析、甲基化、部分酸水解和ESI-MS等分析手段,推断出LBLP5-A-OL1的结构为高度分支:以(1→3)-Gal的重复单元为主链,部分半乳糖C-6位存在分支,以-6)Gal(1-,Gal(1-和-4)Gal(1-连接在半乳糖C-6位;支链由Ara(1-,-3)Ara(1-,-5)Ara(1-,-2,4)Rha(1-连接而成。通过ESI-MS分析表明,LBLP5-A-OL3和LBLP5-A-OL4为一系列的寡糖,且结构为Aran1→Galn2→Rhan3(n1=0-6, n2=0-8, n3=0-1)。3. LBLP5-A的体外抗氧化活性研究通过DPPH自由基清除实验、超氧自由基清除和羟自由基清除实验以及还原力测定实验表明,LBLP5-A有很好的抗氧化活性。在浓度为2.0mg/mL, LBLP5-A对DPPH自由基清的清除能力为54.5%,稍弱于VC。LBLP5-A在浓度大于0.6 mg/mL后表现出比VC更强的氧自由基清除活性,当浓度为2.0 mg/mL时VC和LBLP5-A的氧清除能力分别为69.23%和83.68%。LBLP5-A在浓度大于2.5 mg/mL后也表现出较强的还原力以及比VC更强的羟自由基清除能力。
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