普萘洛尔对体外培养婴幼儿血管瘤内皮细胞VEGF、MMP-2的影响及意义

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目的观察普萘洛尔对体外培养血管瘤内皮细胞血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-2的影响,探讨普萘洛尔治疗血管瘤的机理。方法取婴幼儿增殖期血管瘤标本,用组织块结合酶消化法原代培养血管瘤内皮细胞,待培养单层细胞铺满培养瓶底后传代,经传代培养建立血管内皮细胞系,取第3代内皮细胞行人第Ⅷ凝血因子相关抗原进行鉴定。待细胞处于对数生长期,换无血清的1640培养基孵育48小时使细胞同步化,然后分别加入0.5μmol/L和1.0μmol/L的普萘洛尔作为干预组,而对照组不加任何干预因素,继续孵育24小时,用RT-PCR法检测血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-2的表达水平,同期检测血管瘤血管内皮细胞凋亡率,并分析血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-2的表达水平与血管内皮细胞凋亡的相关性。结果1.血管瘤内皮细胞于组织块接种后3-4天开始贴壁生长,内皮细胞呈多角形态,三到四周后细胞开始快速生长并铺满板底。培养细胞第Ⅷ凝血因子相关抗原表达为阳性。2.普萘洛尔作用24小时后,0.5μmol/L普萘洛尔组和1.0μmol/L普萘洛尔组血管瘤内皮细胞凋亡率较对照组明显升高(P<0.01);血管内皮生长因子mRNA相对表达量分别为1.02±0.42、0.93±0.22,比对照组1.61±0.52降低(P<0.05),基质金属蛋白酶-2 mRNA相对表达量分别为0.77±0.18、0.67±0.27,比对照组1.47±0.57降低(P<0.05),但0.5μmol/L普萘洛尔组血管内皮生长因子mRNA、基质金属蛋白酶-2 mRNA与1.0μmol/L普萘洛尔组比较,差异均无显著性(P<0.05)。结论普萘洛尔可以促进体外培养的血管瘤内皮细胞凋亡或抑制其增殖,其机理可能是通过下调血管瘤内皮细胞血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-2的表达,从而促进血管瘤内皮细胞凋亡或抑制其增殖。
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