【摘 要】
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目的探讨Rho/ROCK信号通路干预对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞生物学特性及其Rho家族成员Rho C、ROCK家族成员中ROCK1/ROCK2表达的影响。方法5-氮杂-2ˊ-脱氧胞苷(5-Aza
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目的探讨Rho/ROCK信号通路干预对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞生物学特性及其Rho家族成员Rho C、ROCK家族成员中ROCK1/ROCK2表达的影响。方法5-氮杂-2ˊ-脱氧胞苷(5-Aza-Dc)、古曲霉素A(TSA)单独或联合作用于RPMI8226细胞系,用实时定量反转录聚合酶链锁反应(q RT-PCR)及蛋白印迹(Western Blot)检测药物作用后Rho C、ROCK1及ROCK2的表达;Rho A抑制剂CCG-1423、Rac1抑制剂NSC23766、ROCK抑制剂fasudil作用于RPMI8226细胞,应用Cell counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡水平。结果CCG-1423、NSC23766、fasudil在一定浓度范围内可抑制RPMI8226细胞的生长,且呈剂量和时间依赖性(P<0.05);流式细胞术检测显示CCG-1423、NSC23766处理RPMI8226细胞后,细胞凋亡率较对照组明显升高,而fasudil组与对照组相比,细胞凋亡率较低,呈剂量依赖性(P<0.05);5-Aza-Dc及TSA单独用药组与对照组比较,Rho C、ROCK1及ROCK2 m RNA及蛋白表达明显下降,而联合用药组Rho C、ROCK1及ROCK2 m RNA及蛋白表达下降更为显著,且表达下降强度呈剂量依赖性(P<0.05)。结论5-Aza-Dc及TSA能有效降低Rho C、ROCK1及ROCK2 m RNA及蛋白的表达,且Rho和ROCK抑制剂对人多发性骨髓瘤细胞系有明显的生长抑制及促进凋亡的作用。
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