肺痨康对耐异烟胼肺结核小鼠TLR2、TLR4、IL2及miRNA-155表达的影响及作用机制初探

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目的:考察中药肺痨康对耐异烟肼肺结核小鼠受体蛋白、细胞因子及miRNA表达的影响,初步探讨肺痨康治疗耐异烟肼肺结核的免疫-炎症机制。方法:本研究采用小鼠尾静脉注射法建立耐异烟肼肺结核动物模型,随机分为耐异烟肼组(模型组)、异烟肼组、肺痨康组及异烟肼联合肺痨康组,分别给予生理盐水、异烟肼、肺痨康、异烟肼联合肺痨康灌胃治疗56天;另设空白对照组,给予生理盐水灌胃。①比较小鼠一般体征及体重变化,造模4周后取小鼠肺脏组织进行细菌培养;治疗结束后肉眼及光镜下观察小鼠肺、肝、脾三脏组织病理变化。②免疫组化方法,检测各组小鼠肺组织中TLR2、TLR4、IL2的含量。③ 实时定量PCR检测法,测定各组小鼠肺组织中miRNA-155的表达水平。结果:①与空白组比较,模型组小鼠体重变化有统计学意义(P<0.05),肺脏细菌培养可见明显菌落生长;与模型组比较,肺痨康及异烟肼联合肺痨康治疗可改善感染结核小鼠的皮毛、精神状况及进食等一般状态,使小鼠的体重正常增长(P<0.05),使小鼠肺、肝、脾脏炎症显著减轻(P<0.05)。②与空白组比较,模型组TLR2、TLR4含量明显升高(P<0.05),IL2明显降低(P<0.05);与模型组比较,肺痨康及异烟肼联合肺痨康治疗对TLR2、TLR4的高表达有显著下调作用(P<0.05),且能显著升高IL2的含量(P<0.05)。③与空白组比较,模型组miRNA-155的表达显著上调(P<0.05);与模型组比较,肺痨康及异烟肼联合肺痨康治疗可明显抑制高表达的miRNA-155 (P<0.05)。结论:①从造模后动物的一般体征、客观指标及模型的稳定性等方面进行判断分析,采用小鼠尾静脉注射法建立肺结核小鼠模型是成功的。②肺痨康治疗耐异烟肼肺结核模型小鼠,能显著改善小鼠的一般体征及组织病变,减轻肺、肝、脾脏炎症反应,抑制TLR2、TLR4蛋白及miRNA-155基因的高表达,同时显著升高细胞因子IL-2的表达。③耐异烟肼结核分枝杆菌感染动物后可引起TLR2、TLR4及miRNA-155表达的显著上调,肺痨康对耐异烟肼肺结核的治疗作用机制可能是通过抑制TLR2、TLR4及 miRNA-155的高表达,阻断相关炎症信号转导通路的激活及相关炎症基因的表达,减弱了由它们介导的炎性因子的释放,同时促进T细胞生长因子IL-2的分泌,增强机体免疫力,从而抑制炎症反应,减轻组织病理损伤,起到免疫抗感染的作用。
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