树状DNA放大技术在临床基因诊断中的应用

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应用DDH对生殖道尖锐湿疣中HPV DNA的分型检测人乳头瘤病毒是一种嗜上皮性病毒,引起人类多种与皮肤、上皮和粘膜相关的病变。目前认为该病毒家族包括至少80多种不同亚型。为建立一种新型、高特异性和高敏感性的病原体检测方法,本文以生殖道尖锐湿疣中HPV 6/11型感染为研究对象。从手术切除的50例生殖道尖锐湿疣新鲜标本和15例正常人血清中,提取总DNA,同时用树状DNA杂交(DDH)技术和PCR进行HPV DNA的分型检测。结果50例尖锐湿疣中,以DDH方法检测,感染HPV6型者20例,感染11型者24例,6/11型混合感染者3例,阴性3例,总检测率达94%;以PCR方法检测,HPV6型感染者21例,11型感染者24例,6/11型混合感染者3例,阴性2例,总检测率为96%。15例正常人血清中,以DDH方法检测,HPV感染的假阳性率为0%;以PCR检测,假阳性率为6.67%。同时,本文还以HPV阳性标本对DDH方法做了敏感度的测定,结果阳性病例DNA检测最低浓度为97.28pg/ml。研究表明,DDH技术具有较高敏感性和高特异性,且成本较低,操作安全简便,可适用于基层中小医院较大样本量筛查。
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