芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织SOCS-3、IGF-1表达的影响

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目的:观察芡实对糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)大鼠肾组织中SOCS-3及IGF-1表达的影响,进一步探讨芡实延缓糖尿病肾病进展的可能机制。方法:健康清洁级雄性SD大鼠60只,适应环境1周后,用随机数字表法抽取10只为正常对照组(NC组),其余50只大鼠采用单剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ45mg/Kg)以建立糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病组(DN组)、糖尿病肾病+小剂量芡实治疗组(EL组1.5g/kg/d)、糖尿病肾病+中剂量芡实治疗组(EM组3.0g/kg/d)、糖尿病肾病+大剂量芡实治疗组(EH组6.0g/kg/d)及糖尿病肾病+氯沙坦钾治疗组(LP组30mg/kg/d),正常组腹腔注射相同体积不含STZ的柠檬酸钠缓冲液。造模组大鼠于72h后断尾测血糖,若血糖值>16.7mmol/L,认为糖尿病模型成立;3周后测24h尿蛋白定量>30mg/d,认为DN模型成功。各实验组给予相应剂量药物灌胃治疗,模型组及对照组给予等体积的蒸馏水灌胃,治疗12周。于治疗12周末记录各组大鼠的体重,留取24小时尿液标本及空腹血标本,分别用来检测24小时尿蛋白定量、血清尿素氮(BUN)及血肌酐(Scr),然后经腹腔注射水合氯醛麻醉大鼠,逐层打开腹腔,经腹主动脉取血,冲洗肾脏至灰黄色,留取肾组织标本采用HE染色、Masson染色、PAS染色及电镜观察肾组织的病理变化,采用免疫组织化学法及Western blot技术检测各组大鼠肾组织中SOCS-3与IGF-1的表达及分布情况。结果:(1).生化参数的比较:治疗12周末,NC组大鼠血糖、血尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白定量均在正常范围内波动;与NC组相比,DN组大鼠血尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白定量明显增加(P<0.05);与DN组对比,EM组、EH组及LP组大鼠血尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白定量显著降低(P<0.05);(2).肾脏病理改变:12周末,在光镜、电镜下可见,NC组大鼠肾小球、肾小管的形态规则、结构清晰、均匀分布,未见系膜细胞、内皮细胞增殖及纤维组织产生;DN组大鼠的肾组织肾小球结构紊乱,细胞数量增多,体积增加,系膜细胞增生,系膜区扩大、变形,基底膜弥漫性增厚,肾小管官腔增宽,线粒体肿胀;与DN组对比,LP组、EH组及EM组大鼠肾脏病理改变减轻;(3).SOCS-3、IGF-1表达情况:12周末,免疫组化及Western blot法测定,与NC组对比,DN组大鼠肾组织中SOCS-3的表达增加,IGF-1的表达显著升高(P<0.05),LP组、EH组及EM组较DN组大鼠肾组织SOCS-3表达明显增多、IGF-1表达明显下降(P<0.05)。结论:芡实可减少尿蛋白,保护肾功能。芡实可能通过上调SOCS-3的表达,抑制IGF-1的过表达,从而延缓DN进展,发挥对肾脏保护作用。
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