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本研究为探索双歧卫矛(Euonymus.distichusLevl)组织培养快速繁殖的有效途径,以双歧卫矛的茎段和试管苗叶片为外植体材料,对双歧卫矛的组织培养以及植株再生进行了系统研究,研究主要结果如下:
1.外值体最适宜的取材季节是春季,尤其是4月份,在这一时期外值体启动率最高、同时污染率也较低。启动率达到92.33%,而污染率仅为17.08%。
2.双歧卫矛的茎段用0.1%的Hgcl2灭菌最佳灭菌时间为8min。
3.初代培养:茎段诱导腋芽以MS+BA2mg/L+IBA0.1mg/L+NAA0.05mg/L为最适宜培养基配方组合,诱导率达到82%。而茎段诱导愈伤的最佳培养基组合为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+2,4-D0.1mg/L。出愈率为65.6%。叶片诱导愈伤的最优组合为MS十6-BA2mg/L+IBA0.1mg/L+2,4-D0.05mg/L。但叶片愈伤启动率仅为23.6%。
4.适宜于不定芽继代增殖培养的最优组合为:MS+2.0mg/+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L。月增殖系数达到5.29。愈伤组织增殖的最优组合MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.5mg/L+2,4-D0.05mg/L。增殖系数达到85.1。愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L。再生率达到73.06%。
5.较有利于双歧卫矛生根的培养基是1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA1mg/L1+AC0.1%。生根率达到80.6%。平均7条根,芽高达到7.8cm。
6.在影响玻璃化因素的实验中,研究得出:(1)琼脂浓度与玻璃化系数成负相关,当琼脂浓度为7g/L时玻璃化最低,玻璃化系数为0,因此琼脂为7g/L是最理想的浓度。(2)糖浓度也与玻璃化系数成负相关,在30g/L、40g/L、50g/L时玻璃化系数控制为0,结合繁殖系数比较,30g/L为理想的浓度。(3)BA浓度与玻璃化系数成正相关。本实验结果表明当BA浓度为2.0mg/L防止玻璃化综合效果最好。
7.炼苗与移栽:在珍珠岩、蛭石、河沙的配比为3:2:1的基质中的移栽成活率最高,为86.7%。