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目的:考察TIM-3mRNA表达水平的监测在肾移植术后急性排斥反应的诊断和预后评估方面的作用,为肾移植后急性排斥反应的无创性诊断寻求潜在的新的预警分子。方法:本研究中包含AR组(急性排斥反应组,n=24),NO-AR组(非急性排斥组,n=20)。连续留取手术后血液样本(术后1,4,7,14,21天)和急性排斥反应时血液样本(冲击治疗前、治疗后1,4,7天)。另肾移植术后满1年,肾功能良好患者作为Stable组(肾功能稳定组,n=18)以进一步对照。RT-PCR的方法检测TIM-3mRNA的表达水平。ROC曲线检验TIM-3mRNA表达水平在诊断急性排斥反应时的灵敏度和特异度。相关性分析考察TIM-3mRNA表达与肾移植术后血肌酐水平的关系。结果:TIM-3mRNA在急性排斥反应发生时表达水平明显升高,与NO-AR组和Stable组相比均有显著性差异(286.72±86.28vs126.10±28.31,286.72±86.28vs96.91±17.88,p=0.00).ROC曲线分析TIM-3mRNA表达水平在诊断急性排斥反应时的灵敏度和特异度分别可达到90.91%和90.00%。抗排斥治疗后TIM-3mRNA表达水平下降。TIM-3mRNA表达水平与肾移植术后血肌酐水平有较好的相关性(r2=0.716,p=0.00)。结论:肾移植术后患者外周血中TIM-3mRNA表达水平的检测可以作为无创诊断急性排斥反应的指标。但是TIM-3mRNA在急排冲击治疗后的表达趋势并不能判定急性排斥反应的预后,这主要是因为TIM-3mRNA在急性排斥患者不同个体间表达差异很大所致。目的:研究TIM-3分子配体Galectin-9腹腔注射对同种异基因小鼠移植皮片存活的影响;并初步研究其对体内Teff和Treg免疫平衡的调控作用。方法:60只C57BL/6小鼠(受者),30只BALB/c小鼠(供者),建立同种异基因小鼠皮肤移植模型。对照组C57BL/6小鼠术后连续7天给予生理盐水腹腔注射;实验组C57BL/6小鼠术后连续7天给予Galectin-9100ug腹腔注射。术后连续记录并留取影像资料以观察移植皮片的存活时间,累积生存函数计算皮片MST (Median Survival Time,中位存活时间);术后7天移植皮片HE染色观察皮片内的淋巴细胞浸润情况;FCM(流式细胞术)检测小鼠脾脏、外周血CD4+TIM-3+T、CD4+TIM-1+T、Thl7、CD4+CD25+Foxp3+Treg所占T淋巴细胞亚群的比例;ELISA法检测外周血细胞因子IL-2.IL-4.IL-17及IFN-γ的表达水平。结果:1.Galectin-9腹腔注射可以延长同种异体小鼠皮肤移植物的存活时间,对照组和实验组移植皮片的MST分别为12.5天和16天;2.Galectin-9腹腔注射减轻同种异基因皮肤移植术后第7天移植皮片内的淋巴细胞浸润;3.Galectin-9腹腔注射对体内Teff细胞比例有下调的作用,但对Treg细胞比例无影响。不同淋巴细胞亚群变化如下:①CD4+TM-3+T实验组术后7天脾脏组织和外周血的比例均下降(脾4.82±1.01%vs2.84±0.89%,血7.13±1.82%vs4.94±1.56%,p<0.05);术后14天无差异(脾3.34±1.10%vs3.44±0.98%,血2.79±0.87%vs2.67±0.84%,p>0.05)。②Th17实验组术后7天,外周血的比例下降(12.42±3.67%vs5.79±1.68%,p<0.05),脾脏组织Th17无变化(5.54±1.38%vs5.78±1.64%,p>0.05);术后14天,外周血中比例无差异(5.21±1.96%vs5.91±2.03%,p>0.05),实验组脾Th17比例下降(4.61±1.78%vs7.91±2.34%,p<0.05)。③CD4+TIM-1+T脾脏组织中的比例术后7天,14天均无差异(7天3.79±1.35%vs4.27±1.52%;14天3.19±1.26%vs3.92±1.34%,p>0.05);外周血中7天无差异(34.74±4.80%vs34.50±5.00%,p>0.05),14天时实验组比例有上升(52.80±8.79%vs34.86±5.67%,p<0.05)。④CD4+CD25+Foxp3+Treg术后7天、14天其在脾脏组织和外周血淋巴细胞中的比例均无差异。脾(7天10.57±2.56%vs10.02±3.04%,14天11.49±2.87%vs12.93±3.12%,p>0.05);血(7天8.00±1.78%vs8.20±2.01%,14天9.76±2.45%vs10.90±2.67%,p>0.05)。4. Galectin-9腹腔注射可以显著降低术后7天外周血IFN-γ (51.33±8.16pg/ml vs98.41±5.01pg/ml, p=0.00)和IL-17的表达水平(48.50±8.48pg/ml vs15.17±5.46pg/ml, p=0.00);但对IL-2(23.17±4.22pg/ml vs26.50±3.78pg/ml, p=0.180)和IL-4(86.83±13.33pg/ml vs99.67±11.64pg/ml,p=0.107)表达水平无影响。结论:Galectin-9腹腔注射可以延长同种异体小鼠皮肤移植的存活时间,并明显减轻同种异体小鼠皮肤移植物中的淋巴细胞浸润;该作用与其特异性下调Th17和CD4+TIM-3+T有关;同时Galectin-9不改变CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在CD4+T淋巴细胞群中的比例