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本文以牛卵母细胞为研究模型,旨在建立一套哺乳动物卵母细胞简易高效实用的冷冻保存技术体系,以期为现代胚胎生物技术研究提供基础材料保障,为珍稀和濒危种质资源保存“卵子库”的建立提供技术支持,并为人类医学治疗不育症的研究提供参考模型。文章采用自行研制的玻璃化冷冻液OPS两步法超低温冷冻保存牛卵母细胞,解冻后进行免疫荧光染色观察,以确定卵母细胞解冻后活力和冷冻过程中的损伤的部位;对解冻后卵母细胞进行孤雌激活、体外受精、体细胞核移植以及转基因操作,并对所获得胚胎进行体内、外培养观察,以确定其支持各种操作后体外生产胚胎的发育能力。