山奈酚(Kae)有广泛的药理活性,具有广阔的制剂研发及临床应用前景。然而,山奈酚的难溶性等生理特性限制了其进一步的开发与利用。本课题的目的是在山奈酚脂质体的基础上,将其表面包覆一层亲水性物质,以减少外界对内部药物的吸附,提高其稳定性,从而更好的发挥山奈酚的药理活性。同时对山奈酚及不同脂质体的体外释放行为做出评价,并初步探究其抗肿瘤作用机制。主要内容和结果如下:1.对山奈酚进行处方前研究,建立了其原料药及脂质体的高效液相色谱含量测定方法,山奈酚的表观油水分配系数实验表明其为难溶性药物,山奈酚原料药在浓度为5%的吐温-80溶液中的溶解度最大,可选择5%的吐温-80溶液为山奈酚的体外释放介质。2.采用蛋黄卵磷脂和胆固醇为主要辅料,通过薄膜分散法制备了常规脂质体(KLs),探头超声10 min进行分散,以脂质体粒径及包封率为指标,通过单因素试验选出最佳脂质体制备处方(山奈酚:蛋黄卵磷脂:胆固醇:水和介质=5:100:8.35:5)。在处方中加入十八胺(十八胺:山奈酚=1:40)即可制得阳离子脂质体,将其滴加到浓度为0.2%的羧甲基壳聚糖溶液中,匀速搅拌30 min即为羧甲基壳聚糖包覆的山奈酚脂质体(CMCS-KLs)。3.对这两种山奈酚脂质体的理化性质等进行考察。透射电镜下观察的形态特征均呈规则的球形,粒子间无粘连,CMCS-KLs表面有一层半透明物质。修饰后的脂质体的粒径及电位均大于KLs。采用葡聚糖凝胶柱法测定脂质体包封率,为83.19±2.52%。稳定性试验说明脂质体外包覆的羧甲基壳聚糖可提高脂质体纳米粒的体外稳定性。采用体外溶血性和异常毒性试验对包覆前后的山奈酚脂质体进行初步安全性评价。结果表明所制备的脂质体均具有较高的安全性,同时给药小鼠在实验观察期内无异常现象,符合异常毒性检查的标准。4.以透析袋法对药物体外释放行为进行考察,结果表明,除了羧甲基壳聚糖包覆的脂质体在pH为7.4时的释放速度有所减小外,pH条件的改变对其他制剂的释放速度均无明显影响。两种脂质体在三种pH释放条件下的释放率均明显高于山奈酚,修饰后的脂质体前期释放速度小于山奈酚脂质体。说明CMCS的存在可在一定程度上阻滞脂质体的突释。5.以SCG-7901细胞为实验对象,通过细胞毒性实验、AO染色、克隆形成实验、细胞周期阻滞及凋亡实验等考察山奈酚及两种山奈酚脂质体抗肿瘤作用活性。其中,CMCS-KLs对该细胞增殖克隆的抑制作用最为明显,且具有很强的诱导细胞凋亡的作用,其早期细胞凋亡率为57.19%,高于Kae组的44.13%和KLs组的51.28%。周期实验表明,Kae、KLs及CMCS-KLs均可抑制S期细胞的增殖,且以CMCSKLs的作用最为显著。本文通过制备脂质体,可显著增加山奈酚的溶解度,改善药物的体外释放行为;所使用的辅料安全性高,可用于静脉注射给药;增强药物的抗肿瘤活性,诱导SCG-7901细胞的凋亡。