秀珍菇(Pleurotus pulmonarius),学名为肺形侧耳,别名珊瑚菇、袖珍菇、迷你蚝菇,珍珠菇等,隶属于菌物界(Fungi),担子菌门(Basidiomycota),伞菌纲(Agaricomycetes),伞菌亚纲(Agaricomycetidae),伞菌目(Agaricales),侧耳科(Pleurotaceae),侧耳属(Pleurotus)。秀珍菇是春秋冬木腐菌,其形美味鲜,鲜嫩爽口,营养丰富,是一种新兴、广受好评的食用菌品种。新品种的开发、鉴定、驯化及育种在秀珍菇产业发展上具有重要意义。本研究主要包括以下几个部分:1本研究在野外采集的一株大型野生食用菌,通过形态学观察,其形态与肺形侧耳的相似,根据ITS序列,用MEGA5.0软件的最大似然法构建进化树显示其与肺形侧耳系统进化树单独的分支上。将该菌株与其他肺形侧耳菌株进行拮抗试验可知,该野生菌株与其他肺形侧耳菌株均能形成明显的拮抗线。采用DNA分子标记手段(RAPD、ISSR、SRAP)将其与其他已知秀珍菇菌株进行聚类分析,结果表明,该野生大型真菌与其他供试的秀珍菇菌株间具有较大的遗传距离,从而可知其为一种新型的秀珍菇菌株。从形态特征、ITS可知野生菌株是肺形侧耳;从拮抗试验、DNA分子标记遗传差异分析可知野生菌株与其他秀珍菇存在较大的遗传差异。2野生菌株的驯化。以福建省认定的秀珍菇菌株秀迪1号为对照菌株,通过单因素实验对该野生秀珍菇菌株生长所需的碳源、氮源、生长温度、生长pH、以及秀珍菇菌丝在栽培基质中所需的水分和酸碱度进行筛选。碳氮源筛选试验中,以可溶性淀粉为碳源时,试验菌株菌丝生长速度快,长势最好,以酵母粉为氮源时,菌丝生长速度快且长势好,即该菌株最适的碳氮源为可溶性淀粉和酵母粉,与对照菌株相似。该野生菌株的生长温度范围为5℃-45℃,温度高于50℃,菌丝不萌发,最适生长温度为30℃;在对酸碱环境的适应试验中,野生菌株的菌丝生长pH范围为3-10,pH小于3或者pH大于10时,菌丝不生长,最适生长pH值为7,该菌株更能适宜在中性环境中生长。在对栽培基质的含水量筛选试验中,菌丝生长的适宜含水量范围为55%-75%,在含水量为65%时,菌丝生长速度最快。栽培料中添加一定的轻质碳酸钙有助于菌丝的生长,最适宜的添加量为2%。采用熟料袋栽的方式进行出菇,常规的生产原料如木屑、棉籽壳、玉米芯、麸皮等配合使用即可满足菌丝生长的要求。在木屑棉籽壳培养料中菌丝满袋时间为38-45 d,排袋方式出菇时,空气相对湿度85%-90%;在17-35℃范围内均可出菇,最适出菇温度为20℃-25℃。开袋出菇管理7-10d后现原基,原基形成2-3d后即可采收子实体,采收结束后经10-15d的转潮培养后可进行二潮菇的出菇管理,首潮出菇即可使生物转化率达到29.87%。对已进行人工驯化的野生菌株的子实体进行营养成分的检测,结果表明其子实体营养成分含量高,游离氨基酸的含量高于20%,其中人体所需的8种必需氨基酸占游离氨基酸总量约40%,脂肪及蔗糖含量均低于2%,含有的还原糖不高于8%,粗纤维含量约为8%,该菌株子实体的营养成分的含量随着不同的出菇条件而有所变化。3通过三轮杂交法、OWE-SOJ技术以及核迁移试验将该野生秀珍菇的单核菌株准确地分为T1、T2、T3、T4四种交配型。通过单核菌株配对杂交,并以锁状联合的有无验证,获得45株自交菌株,与秀迪1号的单核菌株杂交获得176株杂交菌株,而后从各交配型的野生秀珍菇的单核菌株中随机选取一株与秀迪1号及龙岩主栽菌株进行双单杂交并获得8株杂交子。通过生长速度的筛选,结合与亲本的拮抗试验,选出2株生长速度较快的自交菌株ys-1-22以及ys-5-27,4株长势较好且生长速度较快的杂交菌株ys-5-x-36、ys-27-x-36、ys-24-x-10和ys-22-x-38。将筛选获得的6株杂交子与8株双单杂交获得的杂交菌株以及亲本菌株通过RAPD标记、ISSR标记以及SRAP标记试验进行遗传距离的综合聚类分析。在D=6时,将各杂交子与亲本分为4个菌株符合群以及4个独立菌株。将经过生长速度初筛的杂交子14株及亲本进行出菇试验。出菇结果显示,通过单孢自交获得的菌株ys-1-22的生长速度快于亲本,产量显著高于亲本,是具有超亲优势的菌株;虽然ys-5-27的生长速度亦快于亲本菌株,但在18-22℃的温度范围内无法形成原基。采用单孢杂交获得的子代ys-24-x-10的各性状均优于亲本菌株,但菌盖颜色偏白且产生灰黑色斑点,可用于进一步杂交的实验材料;双单杂交的杂交子代中,杂交子的性状改变的范围小,ys-24-sc的生长速度与亲本相比较慢,产量与亲本无显著差异,但口感优于亲本(龙岩市生产菌株“秀珍菇98”)。