目的:心房颤动(atrial fibrillation,AF),简称房颤,在临床上是一种最常见的心律失常。房颤常使患者感觉心悸、胸闷、气短等不适,更甚者会出现脑卒中、心力衰竭等并发症。我国老龄化问题日趋严峻,心血管疾病发病率也在不断攀升,导致心房颤动对社会及家庭带来的负担越来越重。房颤的发生发展机制极其复杂,使得房颤的治疗不能尽如人意。既往研究发现,房颤时心肌会发生能量代谢的改变,于是通过能量代谢的调节干预房颤的治疗越来越受到人们的关注。曲美他嗪作为能量代谢的药物目前主要用于治疗缺血性心脏病。然而,临床研究和实验研究都提示曲美他嗪对房颤的治疗也有效果。本研究的主要目的是通过对家兔右心房进行快速起搏,从而制作出房颤的动物模型,从能量代谢角度观察曲美他嗪对家兔心肌细胞的影响,以期为该药在房颤领域应用提供更多的依据。方法:选取河北医科大学实验动物中心提供的30只成年NZW家兔,体重2.0-2.3kg,雌雄不限,分为假手术组(空白组)、生理盐水组(对照组)和曲美他嗪组(实验组)三组,每组为10只。适应性喂养家兔3天后,曲美他嗪组给予曲美他嗪8mg/(kg.d)灌胃3周,假手术组、生理盐水组给予相同体积的0.9%生理盐水灌胃3周。经家兔耳缘静脉按照50mg/kg剂量注射10%水合氯醛,成功将家兔麻醉后,仰卧位固定,将兔四肢连接心电图机,记录体表心电图,于兔颈部正中位切开,行气管插管,成功分离右侧颈内静脉,经颈内静脉置入4F双极电极至右心房,调整电极位置,当BL-420生物机能实验系统显示大A波、小V波时,提示电极此时正处于右心房,遂即固定电极,用蘸有生理盐水的纱布覆盖切口,假手术组不进行起搏刺激,而生理盐水组及曲美他嗪组家兔均进行如下操作:以600次/分的频率对家兔进行8小时的快速心房起搏。刺激完成后,采用空气栓塞处死法处死家兔,无菌条件下,立刻开胸,取出心脏,留取新鲜右心房心肌组织块约0.5g(湿重),立即置于液氮中保存。制备实验标本,应用高效液相色谱法测定标本中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)含量。实验数据的统计分析均应用SPSS13.0(Statistical Package for the Social Sciences 13.0)统计软件进行,计量资料指标均进行正态性检验及方差齐性检验,各统计指标均采用均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用随机区组设计资料的方差分析,两两比较均采用S-N-K法进行比较。检验水准为α=0.05。结果:1 ATP、ADP、AMP定性分离取假手术组、生理盐水组溶液和曲美他嗪组色谱图各一份,分别与标准品色谱图比较分析。结果显示,10分钟内,ATP、ADP、AMP的峰图已经达到了有效分离,由标准品色谱图可以看出,ATP、ADP、AMP的洗脱时间分别为6.067min、5.058min、3.901min,假手术组、生理盐水组溶液和曲美他嗪组的色谱图中ATP、ADP、AMP的洗脱时间几乎与标准品一致(Fig.1,Fig.2,Fig.3,Fig.4)。2家兔心肌细胞内ATP、ADP、AMP的定量分析应用上述方法,分别将假手术组、生理盐水组和曲美他嗪组心肌组织制备成标本,进行测定。结果(table 1)显示,假手术组、生理盐水组和曲美他嗪组的ATP含量分别为32.56±7.37μg/g、19.69±4.73μg/g、28.08±6.76μg/g,ADP含量分别为194.60±29.70μg/g、224.05±31.92μg/g、256.27±23.10μg/g,而AMP含量分别为348.32±75.72μg/g、462.53±88.60μg/g、364.02±55.14μg/g。生理盐水组与假手术组相比较,ATP含量减少了39.53%,而ADP、AMP分别增加了15.13%、32.79%,差异有统计学意义(P<0.05);曲美他嗪组与假手术组相比,ATP、AMP的含量变化无统计学意义(P>0.05),而ADP含量增加了31.69%,差异有统计学意义(P<0.05);曲美他嗪组与生理盐水组相比较,曲美他嗪组ATP增加了42.61%,ADP增加了14.38%,AMP减少了21.30%,差异有统计学意义(P<0.05)。3家兔心肌细胞内能荷水平的改变由table 2可知,假手术组、生理盐水组、曲美他嗪组能荷水平分别为0.23±0.02、0.19±0.02、0.24±0.03。生理盐水组与假手术组比较,能荷水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);曲美他嗪组较假手术组的能荷水平的改变无统计学意义(P>0.05);曲美他嗪组和生理盐水组二者相比较,能荷水平增加了26.32%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1房颤导致心肌细胞内ATP含量降低,ADP、AMP的含量增加,房颤引起心肌能量代谢的改变。2曲美他嗪可以提高家兔心肌细胞内ATP、ADP含量,降低AMP含量,并提升能荷水平,从而优化心肌能量代谢。