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叶绿体表达系统具有表达量高、基因表达原核性、母性遗传、多顺反子表达、便于定点整合等优点，它已成为表达外源蛋白研究的热点之一。为了研制新型禽流感病毒疫苗，我们在GenBank中搜索H5N1型禽流感病毒不同毒株外壳蛋白基因簇基因．M1、M2、HA、NA的序列，通过Align Ⅹ程序对序列进行比对来设计基因M1、M2、HA、NA的扩增引物；利用RT—PCR方法克隆得到此四个基因，且在基因M2、HA．NA的5端添加了RBS序列；通过基因克隆技术将此四个基因按一定的顺序串联入实验室构建的烟草叶绿体表达载体pABPR中。经酶切和序列分析鉴定，我们构建完成了含H5N1型禽流感病毒外壳蛋白基因簇基因的叶绿体遗传转化的表达载体。pABPR—AIV，并通过基因枪法转化了烟草W38(Nicotiana tabacum Wisconsin 38)，目前已经诱导分化得到一颗烟草幼苗，还有待于进一步诱导分化，并对幼苗进行转基因检测。
为了探讨霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit，CTB)与龋齿致病菌 S．mutans抗原表位融合表达蛋白的免疫增强效应，本文对表达的融合蛋白Trx—CAT—GLU、Trx—CAT—GLU—SBR、CTB—CAT—GLU和CTB—CAT—GLU—SBR 进行了小鼠主动免疫实验。这四个融合蛋白是将龋齿主要病原菌变形链球菌(Streptococcus mutans)葡糖基转移酶(glucosyltransferase，GTF)的催化表位(catalytic domain，CAT)、葡聚糖结合表位(glucan-bingding domain，GLU)的编码基因与霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit，CTB)基因或者硫氧还蛋白(thioredoxin，Trx)基因融合表达得到的，其中，融合蛋白Trx—CAT—GLU、Trx—CAT—GLU—SBR作为对照。对免疫实验过程中采取的血液、唾液样本通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测特异性抗体IgG、IgA。结果显示在免疫过程中，这些融合蛋白可以诱导小鼠体产生血清IgG抗体，滴度最高达OD405=4.7；融合蛋白Trx—CAT—GLU、CTB—CAT—GLU免疫组可以刺激小鼠产生比Trx—CAT—GLU—SBR、CTB—CAT—GLU—SBR免疫组更高的抗S．mutans血清IgG抗体；与融合蛋白Trx—CAT—GLU、Trx—CAT—GLU—SBR相比，融合蛋白CTB—CAT—GLU、CTB—CAT—GLU—SBR可以诱导产生更多的抗GTF血清IgG抗体；但是在四种融合蛋白免疫组都没有检测到预期的唾液IgA抗体。