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目的研究解放军总医院临床分离130株MRSA的耐药情况，从中筛选hVISA，初步探讨hVISA的耐药机制。方法收集2008年1月-2009年12月130株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，采用微量肉汤稀释法和琼脂稀释法进行含多种新型抗菌药物在内的体外药敏试验，使用BHIT5(含替考拉宁5μg/ml的脑心浸液琼脂)、BHIV6（含万古霉素6μg/ml的脑心浸液琼脂）和Macrodilution Etests法(宏量Etests法)对130株MRSA进行hVISA筛选并使用改良PAP-AUC(菌群分析策略)法进行确认。利用实时荧光定量PCR技术探讨质控菌株N315与hVISA细胞壁合成相关基因的表达情况，利用PCR技术了解细胞壁相关基因的突变情况，利用透射电镜观察N315与hVISA细胞壁厚度，采用Graphpad Prism软件对两组间细胞壁相关基因相对表达量与细胞壁厚度之间的差异进行t检验。结果130株MRSA对抗MRSA一线用药糖肽类抗生素万古霉素及替考拉宁均100%敏感，但部分MRSA在万古霉素敏感范围内出现高的MIC，万古霉素MIC在1到2μg/ml总菌株数已达46株，占35.4%，对多种新一代抗菌药物如达托霉素、利奈唑胺、替加环素全部敏感。130株MRSA中发现1株hVISA。MRSA细胞壁相关基因graF、graR在N315与hVISA两株菌间相对表达量无明显差异，细胞壁相关基因glmS、PBP4、vraS、vraR、murZ、sgtB、dlt在hVISA中较N315表达上调，相对表达量差异具有统计学意义（P＜0.05）。hVISA的vraS基因发生突变，第44位G替换了T,引起编码的氨基酸发生改变，甘氨酸替换了缬氨酸。hVISA（36.72±1.04nm）的细胞壁较N315（28.15±1.25nm）明显增厚，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论130株MRSA虽对万古霉素全部敏感，但部分MRSA在万古霉素敏感范围内出现高的MIC，万古霉素MIC在1到2μg/ml总菌株数已达46株，占35.4%。多种新药对MRSA有良好活性。130株MRSA中发现一株hVISA。hVISA较万古霉素敏感菌株N315有明显增厚的细胞壁，hVISA对万古霉素低水平耐药的分子机制可能与细胞壁相关基因表达上调与突变有关。