异甘草酸镁通过调控ERK1/2信号通路治疗急性肝衰竭的动物实验研究

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目的通过观察异甘草酸镁注射液(MgIG)治疗急性肝衰竭(ALF)大鼠的疗效,检测ALF组织中ERK1/2信号通路相关蛋白及肝功能和凝血酶原活动度,深入探讨MgIG的抗炎机制。方法将60只Wistar大鼠随机分为5组,每组12只,即正常对照组(control组)、ALF模型组(model组)和MgIG治疗组(25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg)。model组和MgIG治疗组用CCl4溶液灌胃制作成ALF模型,24h后分别经0.9%盐水和三种不同剂量MgIG(25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg)治疗。造模后48h内观察各组大鼠活动、毛发、精神、体重以及生存状况等情况。同时,检测血中ALT、AST和PTA水平。48h后处死大鼠,取肝组织并观察各组肝组织的病理学变化,用qRT-PCR法检测各组肝组织中ERK1/2核酸含量,Western blotting法检测各组肝组织中ERK1/2蛋白及p-ERK1/2蛋白的表达。结果1.大鼠一般情况:model组逐渐出现精神萎靡、毛发粗糙不整、活动减少、被抓取时无抵抗、不进食、尿黄,体重明显减轻,甚至伴有口鼻出血。MgIG治疗组大鼠随着MgIG给药剂量的增加,精神、毛发、活动、进食、尿量、体重、肝脏形态逐渐改善。2.肝功能检测结果:2.1 model组大鼠肝功能明显恶化,ALT、AST急剧升高,PTA水平显著降低;MgIG治疗组大鼠随着MgIG给药剂量的增加,ALT、AST和PTA水平明显好转;2.2与control组比较,MgIG组(25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg)三个治疗组的ALT、AST和PTA水平均好转,具有统计学差异(p﹤0.01);2.3与model组比较,MgIG 25mg/kg治疗组中ALT、AST和PTA水平好转,但无统计学差异(p﹥0.05);2.4与model组比较,MgIG 50mg/kg治疗组中ALT降低,具有统计学差异(p﹤0.01),AST和PTA水平好转,无统计学差异(p﹥0.05);2.5与model组比较,MgIG 100mg/kg治疗组中ALT、AST和PTA水平好转均具有统计学差异(p﹤0.05);2.6与MgIG 25mg/kg组比较,MgIG 50mg/kg组中ALT、AST和PTA水平好转均具有统计学差异(p﹤0.05);与MgIG 25mg/kg组比较,MgIG 100mg/kg组中ALT和AST水平降低,具有统计学意义(p﹤0.01),PTA水平升高则无统计学意义(p﹥0.05)。2.7与MgIG 50mg/kg组比较,MgIG 100mg/kg组中ALT和AST水平降低有统计学意义(p﹤0.05),PTA水平升高则无统计学意义(p﹥0.05)。3.ERK1/2核酸表达:ERK1/2核酸含量在实验组中显著升高,其中model组和MgIG治疗组与control组比较,ERK1/2 mRNA表达明显增高,且显著性差异(p﹤0.01);而经不同剂量MgIG治疗后,MgIG组ERK1/2 mRNA的表达量显著下调,其中MgIG 50mg/kg、MgIG 100mg/kg两组与model组比较明显降低(p﹤0.05),但MgIG三组治疗组间内比较无差异(p﹥0.05)。4.ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表达:4.1 control组、model组、MgIG 25mg/kg组、MgIG 50mg/kg组和MgIG100mg/kg组大鼠肝组织中ERK1/2蛋白表达比较无统计学意义(p﹥0.05)。4.2 model组、MgIG 25mg/kg组、MgIG 50mg/kg组和MgIG 100mg/kg组大鼠肝组织中p-ERK1/2蛋白明显上调。model组和MgIG治疗组中p-ERK1/2蛋白表达量比control组明显增高,有显著性差异(p﹤0.01);与MgIG 25mg/kg组比较,MgIG 100mg/kg组中p-ERK1/2蛋白表达明显下调,有统计学意义(p﹤0.05)。结论1.急性肝衰竭发生与ERK1/2信号通路的活化密切相关;2.MgIG抗炎保肝作用可能是通过下调ERK1/2信号通路实现的。
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