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背景：乳腺癌已成为女性发病率最高的恶性肿瘤。包括手术切除、术后化疗等在内的综合治疗是提高乳腺癌患者生存率的最有效手段。目前乳腺癌新辅助化疗已被广泛应用。然而肿瘤耐药性的产生是导致乳腺癌患者化疗失败的主要因素。miRNAs是近期肿瘤研究的前沿热点之一。研究表明,,niRNAs能够通过直接作用于靶mRNA而抑制信号传导通路基因或药物诱导的凋亡基因,从而导致耐药。本研究检测了乳腺癌耐药组和敏感组人体标本中miR-489的表达,并通过体内外功能实验和靶基因验证,揭示了miR-489抑制乳腺癌耐药性产生的机制。方法：收集乳腺癌穿刺病例组织标本及同病例化疗后手术切除组织标本,并据化疗敏感性分为耐药组和敏感组。取化疗前穿刺病例组织提取RNA、逆转录、实时荧光定量PCR检测两组各自miR-489表达；miR-489前体及miR-489抑制剂瞬时转染乳腺癌细胞,并进行MTS、EdU实验以检测miR-489对乳腺癌细胞增殖的影响、流式细胞学技术检测miR-489对细胞凋亡的影响、Transwell实验检测miR-489对细胞侵袭转移的影响；建立过表达miR-489荷瘤小鼠模型,观察niR-489对化疗敏感性的影响；利用TargetScan, Pictar和Miranda三种软件预测miR-489的靶基因,并进行荧光素酶报告基因、免疫组化和Western blot验证：免疫组化方法检测耐药组和敏感组乳腺癌标本中SPIN1的表达,分析SPIN1与乳腺癌患者临床病理参数的关系。结果：1.实时荧光定量PCR检测：miR-489在耐药组乳腺癌组织中的表达较敏感组组织明显降低。miR-489在耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7/ADM较亲本细胞MCF-7中的表达明显下调。同时,在高侵袭力的乳腺癌细胞MDA-MB-231中,miR-489的表达相比于低侵袭力的乳腺癌细胞MCF-7、T47D显著降低。2.体外细胞功能学实验：MTS、EdU、迁移与浸润实验结果显示,乳腺癌细胞过表达miR-489后,其增殖、侵袭和迁移能力与对照组相比,均明显降低；流式细胞术结果显示,过表达miR-489组较对照组具有更强的促凋亡作用。然而,miR-489抑制剂组较对照组增殖、侵袭和迁移能力均增强,凋亡能力减弱。综上,我们的结果提示miR-489具有抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移,并促进其凋亡的作用。3.荷瘤裸鼠实验：过表达miR-489组的裸鼠较对照组对化疗敏感,过表达miR-489组的瘤体生长速度、体积明显小于对照组,差异均具有统计学意义,并且,过表达miR-489可抑制肿瘤向周围肌层的浸润。4.预测并验证靶基因：通过Pictar、TargetScan和Miranda软件预测并结合相关文献初步选定8个待验证靶基因,分别进行双荧光素酶实验检测,证实miR-489可与SPIN1的3’-UTR区结合。继而,免疫组化与western blot实验再次验证,结果显示：过表达miR-489组与对照组相比,SPIN1蛋白表达显著降低。这提示SPIN1是miR-489的直接靶基因。5.乳腺癌中SPIN1的表达：SPIN1在化疗耐药组标本中显著高表达,SPIN1的表达与肿瘤分级、淋巴结转移相关。结论：miR-489通过通过下调其靶基因SPIN1的表达在乳腺癌中发挥抑制肿瘤增殖、抑制侵袭和转移,促进细胞凋亡,进而提高化疗敏感性的作用。