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[目的]
本研究旨在对关键蛋白质膜联蛋白A7(Annexin A7)、α-烯醇化酶(α-enolase)在高癌家系鼻咽癌组织中的表达情况进行验证,证实其为本课题前期用蛋白质组学技术鉴定出的关键差异蛋白质,以期初步探讨高癌家系鼻咽癌和Annexin A7及α-enolase之间的一些关系及意义。
[方法]
收集佛山市第二人民医院耳鼻喉科2009年7月~2010年10月门诊有完整的临床及病理资料的病人鼻咽组织新鲜活检标本,其中高癌家系鼻咽癌组织标本、散发性鼻咽癌组织标本及鼻咽粘膜慢性炎症患者组织标本各15例,分别提取其总RNA及蛋白质。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Annexin A7、α-enolase在高癌家系鼻咽癌组织标本、散发性鼻咽癌组织标本及鼻咽粘膜慢性炎症患者组织mRNA水平的表达情况,采用Western-bloting蛋白免疫印迹方法检测Annexin A7、α-enolase在高癌家系鼻咽癌组织标本、散发性鼻咽癌组织标本及鼻咽粘膜慢性炎症患者组织蛋白质水平的表达情况。
[结果]
1.半定量RT-PCR结果:在高癌家系鼻咽癌患者、散发性鼻咽癌患者及鼻咽粘膜慢性炎症患者鼻咽组织中,Annexin A7mRNA的相对表达量依次为0.828±0.046、0.459±0.048、0.312±0.072,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05),而α-enolasemRNA的相对表达量依次为0.843±0.039、0.502±0.037、0.336±0.060,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Annexin A7mRNA和α-enolasemRNA在高癌家系鼻咽癌组织中表达显著上调,其结果与本课题前期的蛋白质组学研究结果一致。
2.Western-bloting蛋白免疫印迹结果:在高癌家系鼻咽癌患者、散发性鼻咽癌患者及鼻咽粘膜慢性炎症患者鼻咽组织中,Annexin A7蛋白相对表达量依次为0.867±0.068、0.624±0.065、0.392±0.087,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05),α-enolase蛋白相对表达量依次为0.780±0.058、0.455±0.062、0.327±0.063,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Annexin A7蛋白和α-enolase蛋白在高癌家系鼻咽癌患者组表达均明显上调,其结果与本课题前期的蛋白质组学研究结果一致。
[结论]
1.Annexin A7在高癌家系鼻咽癌患者鼻咽组织中表达上调,为本课题组前期运用蛋白质组学技术鉴定出的关键差异蛋白质。
2.α-enolase在高癌家系鼻咽癌患者鼻咽组织中表达上调,为本课题组前期运用蛋白质组学技术鉴定出的关键差异蛋白质。
3.Annexin A7和α-enolase有望成为高癌家系鼻咽癌患者早期诊断和筛查的标志物。