MSI2在脑胶质瘤的表达及意义

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目的:
  脑胶质瘤来源于神经上皮的一种原发恶性肿瘤。在颅内中枢神经系统中,该肿瘤发病率高达40%。脑胶质细胞瘤具有异常增殖、侵袭性强、抗细胞凋亡、浸润性生长等特点,因此手术切除难以彻底,预后较差。虽然目前在脑胶质细胞瘤的手术、化疗与放疗方面均取得了提高,但其疗效并未得到明显改善。近年来即使采纳综合治疗手段(手术全切+适形分割放疗+替莫唑胺化疗),胶质母细胞瘤(WHOIV级)病人的生存期仍小于15个月,因此寻找有效的针对脑胶质细胞瘤的特异性分子位点,提高脑胶质瘤患者的预后,这受到研究者们的高度青睐。
  Wnt/β-catenin信号转导通路在生物体中进化相当保守,它对神经干细胞和胚胎的发育过程起着关键性作用。由于该通路的关键蛋白主要由重要的癌基因和抑癌基因编码的,因此该通路的异常活化对肿瘤的形成和进展起着重要作用。研究表明,Wnt/β-catenin信号转导通路的不恰当活化促进了脑胶质瘤的发生进展。
  MSI2作为一种进化保守的RNA结合蛋白,它可通过抑制DKK1表达来激活Wnt信号,进而保证胞浆内的β-catenin水平不被降解,积累过量的β-catenin转入核内TCF/LEF转录因子结合,激活c-myc、cyclinD1等靶基因的转录活性,影响细胞生长分化、迁移等,最终导致肿瘤的发生。MSI2在多种实体肿瘤(包括肝癌、结肠腺癌、葡萄膜黑色素瘤、胃癌、膀胱癌、肺癌、胰腺癌)中均高表达,并促进实体肿瘤的病程进展。但截止现在,MSI2基因与脑胶质瘤之间的关系还没有文献进行报道。本文旨在探索MSI2在脑胶质瘤的表达及其与该肿瘤的相关性。
  方法:
  采用蛋白免疫印迹法(Western blot )检测MSI2蛋白在脑胶质瘤细胞系(U373、U87和U251)中是否表达;应用RT-PCR方法验证MSI2mRNA在三株细胞系(U373、U87和U251)中的表达是否与MSI2蛋白表达水平一致;通过免疫组化方法检测MSI2在68例脑胶质瘤和6例正常脑组织的表达水平,同时研究该蛋白的表达与该肿瘤病理分级的相关性。
  结果:
  (1)蛋白免疫印迹法(Western blot)结果显示,MSI2蛋白在U251细胞系的表达高于其他两个细胞系(U373、U87)。
  (2)RT-PCR检测显示,MSI2mRNA在U251细胞系中的表达高于其他两个细胞系(U373、U87),且RT-PCR与Westernblot检测结果保持一致性。
  (3)免疫组化结果表明:①MSI2在正常脑组织中不表达,在脑胶质瘤中普遍过表达。②随着脑胶质瘤恶性程度和病理级别的升高,MSI2蛋白的表达水平也随之升高,其表达水平与该肿瘤的恶性级别呈正相关。
  结论:
  研究表明,MSI2在脑胶质瘤细胞系中均表达,且其在RT-PCR和Westernblot的结果保持一致。MSI2蛋白在脑胶质瘤组织中普遍表达,且其表达程度与该肿瘤的病理分级呈正相关关系。这提示MSI2与脑胶质瘤的形成和恶性进程息息相关。因此,分子靶向MSI2基因可能为攻克脑胶质瘤这一疾病提供理论基础和思路。
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