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目的:本研究根据蛋白酶体抑制剂与肿瘤治疗相关的原理,探索了研究天然产物的蛋白酶体抑制活性的方法,初步筛选103种天然化合物,并对初筛中显示抑制活性的物质进行研究。方法:培养HL-60细胞,提取细胞总蛋白,将对照剂及待筛选天然产物与HL-60细胞总蛋白及特异的蛋白酶体荧光底物进行反应。蛋白酶体活性以底物被酶水解后产生的荧光值来表示。对初筛中显示抑制活性的物质设不同浓度进一步测定其对蛋白酶体三种酶活性的抑制作用,计算抑制率及IC_(50)。同时采用特异泛素抗体,用Western Blot法验证该物质的蛋