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纤维素水解是纤维素乙醇生产的必要环节,纤维二糖是纤维素水解的中间产物之一,是纤维素酶的竞争性抑制剂,在纤维素的水解过程中起限速作用。纤维二糖发酵酵母菌能直接利用纤维二糖生产乙醇,这不仅能解除纤维二糖的抑制作用,也能降低纤维素水解成本,提高纤维素乙醇产量以及纤维素利用效率,因此纤维二糖发酵酵母菌是纤维素乙醇生产的又一重要发酵微生物。本研究的主要结果如下:1.纤维二糖发酵酵母菌的分离与筛选。利用YM培养基、纤维二糖分离培养基、木糖分离培养基、木聚糖分离培养基从92个腐木样品和1个龙舌兰酒样品中共分离出428株酵母菌;经杜氏管发酵测试,分离出的428株酵母菌中有33株是纤维二糖发酵酵母菌;通过26S rDNA D1/D2序列分析对33株纤维二糖发酵酵母菌进行快速分类鉴定,其中30株已知种酵母菌分布在5个属中,分别是Candida natalensis(2株)、Clavispora lusitaniae(3株)、Debaryomyces hansenii(11株)、Meyerozyma guilliermondii(6株)、Wickerhamomyces pijperi(8株),3株纤维二糖发酵酵母菌新种分别是NYNU 161120T、NYNU 174173T、NYNU 1792T。2.纤维二糖发酵酵母菌新种的鉴定。通过26S rDNA D1/D2序列分析、ITS序列分析和形态学以及生理生化特性研究,3株纤维二糖发酵酵母菌新种分别被鉴定为Clavispora sp.NYNU 161120T、Clavispora sp.NYNU 174173T、Scheffersomyces sp.NYNU 17926T,模式菌株分别是NYNU 161120T(=CICC 33276T=CBS 15234T)、NYNU174173T(=CICC 33277T=CBS 15236T)、NYNU 17926T(=CICC 3320T=CBS 15230T),基因登录号分别是MF136063、MG255710、MG255714。3.纤维二糖发酵酵母菌新种的发酵特性研究。利用葡萄糖发酵培养基、纤维二糖发酵培养基对纤维二糖发酵酵母菌新种的发酵特性进行研究,通过在相同发酵条件下的比较分析,发现菌株NYNU 161120T和NYNU 17926T的纤维二糖发酵性能较好,其中菌株NYNU 161120T在葡萄糖和纤维二糖中的乙醇得率分别是Y(乙醇/葡萄糖)=0.59±0.02 g/g,Y(乙醇/纤维二糖)=0.56±0.02 g/g,菌株NYNU 17926T在葡萄糖和纤维二糖中的乙醇得率分别是Y(乙醇/葡萄糖)=0.54±0.02 g/g,Y(乙醇/纤维二糖)=0.35±0.02 g/g。