纳米羟基磷灰石及其与载药壳聚糖复合材料研究

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羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)是人体和动物骨骼的主要无机成分,具有优异的生物相容性和生物活性,能与骨组织形成牢固的键合,在生物材料等领域被广泛应用。由于纳米材料的特性和优点,纳米羟基磷灰石(n-HA)的合成工艺倍受人们关注。目前合成羟基磷灰石的方法很多,但关于不同溶剂对n-HA形貌和结构的影响报道甚少。羟基磷灰石的制备工艺、组成、结构与其生物学及理化性能间存在密切联系。本文采用氢氧化钙和磷酸为原料,选用水、乙醇、乙二醇和乙酸乙酯作为反应介质,合成了尺寸、形貌和结晶度与自然骨磷灰石相似的纳米羟基磷灰石。通过TEM,XRD,FTIR等分析方法,表征了HA粉体的形貌、物相组成和结构。结果表明,不同溶剂条件明显影响纳米磷灰石晶体的结晶度、形貌和晶体尺寸。同有机溶剂相比,无机溶剂促使磷灰石晶体生长得更大更长,结晶度更高,Ca/P摩尔比大。溶剂的极性是影响磷灰石晶体结构的重要因素之一。溶剂极性大小为:水>乙醇>乙二醇>乙酸乙酯。溶剂极性越大,越易生成碳酸化羟基磷灰石,Ca/P摩尔比也越大。壳聚糖(Chitosan,CS)是一种天然可降解高分子物质,可吸收,适于作缓释、控释制剂的载体,它除了具有良好的生物相容性外,还具有天然的药物活性、抗肿瘤活性、抗溃疡、杀菌、消炎作用,对受损生物体能诱生特殊细胞,促进伤口和骨伤愈合。羟基磷灰石与壳聚糖复合后,可获得良好的骨诱导性、适中的力学性能、可控的降解速率等多方面性能。目前,羟基磷灰石和壳聚糖制备的多孔支架材料被广泛研究,并取得优良成果;而羟基磷灰石和壳聚糖制备成膜的研究未见报道。将药物溶解并均匀分散在成膜材料中可制成壳聚糖缓释膜,当被植入生物体内或覆盖在创伤表面时,引起的生物组织反应小,且可被组织中的酶降解。淫羊藿苷是淫羊藿的主要有效成分之一,能增加心脑血管血量,促进造血功能、免疫功能及骨代谢,具有抗衰老、抗肿瘤等功效。此外,淫羊藿苷还能促进蛋白与DNA合成,促进性激素样作用,还有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。体外培养细胞发现淫羊藿苷既促进成骨细胞的增殖,又促进其进一步分化成熟,能够提高成骨细胞骨形成能力;促进骨组织蛋白质合成,并且还有抑制体外培养的破骨细胞(osteoclast,OC)增殖和形成骨陷窝的作用。目前,以高分子膜作为淫羊藿控制释放载体的研究未见报道。因此,本文采用溶液混合法,直接以水为溶剂合成纳米羟基磷灰石浆料并同壳聚糖溶液混合,同时加入中药淫羊藿,制备了n-HA/CS载淫羊藿膜。用扫描电子显微镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、红外光谱(IR)和力学性能测试等手段对载药膜的理化性能进行表征。载药膜中HA主要以物理掺杂分散于体系中,无明显相分离;壳聚糖与淫羊藿相容性良好;淫羊藿的引入降低了体系的抗张强度、断裂伸长率和吸水率;药物体外释放在最初阶段有突释效应,此后是缓慢释放过程;随着载药量的增大,释放量也逐渐增大。用光学倒置显微镜、四唑盐比色法(MTT)检测MSCs与载药膜体外共培养时的生长状况。结果显示载淫羊藿n-HA/CS膜具有良好的生物相容性,且无细胞毒性。
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