大蜡螟附生微生物多样性研究

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大蜡螟(Galleria mellonella)属鳞翅目、螟蛾科、蜡螟亚科、蜡螟属昆虫。广泛分布于世界各地,是养蜂业的重要害虫。早期,作为养蜂业的重要害虫,主要是对其防治方法的研究。近些年来,随着研究的不断深入,人们认识到大蜡螟蛋白质含量丰富、生长周期短、食料来源丰富、易于繁殖以及可食用等优点,更重要的是其在医学、药学、生理学、农学等学科领域发挥着不可替代的作用。目前国内外对于大蜡螟作为试验昆虫,在昆虫病原线虫、寄生蜂、新型隐球菌、抗菌肽、抗菌免疫机制等方面的研究已取得大量的研究成果。最近,研究者从其幼虫肠道中分离出的细菌菌株,证实其在实验室环境中能够取食和分解聚乙烯塑料,这使得大蜡螟幼虫具有降解塑料的功能得到广泛的关注。本研究利用传统可培养技术结合ITS rDNA、16S rRNA基因序列分析技术,对三种不同饲养条件(用塑料驯化大蜡螟、饲料喂养大蜡螟、野生大蜡螟)大蜡螟各部位(肠道、口器、粪便、体表、丝)的可培养微生物(真菌、细菌)进行分子生物学鉴定,从而对其微生物群落结构及其多样性进行评价分析。该研究一方面进一步补充和丰富了大蜡螟的研究内容,为大蜡螟相关的生物学研究奠定一定的理论基础;另一方面,不但有利于昆虫资源的开发利用,而且也有利于从昆虫这一特殊“生境”中挖掘具有特殊功能的微生物资源,用于开辟生物转化新途径,发展生物质新能源等。本研究从三种不同饲养条件大蜡螟不同部位共计分离真菌72株,分别隶属于2个门,子囊菌门Ascomycota、担子菌门Basidiomycota;其中子囊菌门为优势门,共计分离到58株真菌,占比81.69%。7个纲,13个目,21个属,其中优势属为青霉属(Penicillium),占比19.72%,其次是曲霉属(Aspergillus),占比15.49%。从三种不同饲养条件大蜡螟不同部位共计分离细菌173株,分别隶属于3个门:厚壁菌门Firmicutes、变形菌门Proteobacteria、放线菌门Actinobacteria,其中优势菌门为厚壁菌门,共计分离菌株149株,占比85.99%,8个目,10个科,以及19个属,其中芽孢杆菌属Bacillus、肠球菌属Enterococcus为最优势属,分别占比41.40%、35.67%。对于三种不同饲养条件大蜡螟不同部位的分离率,多样性指数(Shannon-Wiener指数、Simpson指数Margalef指数,Pielou指数)分析得出以下三个主要结论。1)可培养微生物菌株的分离因饲养条件及分离部位的不同而具有较大差异:从整体上分析,对于三种不同饲养条件大蜡螟来说,细菌(173株)的分离率较显著的大于真菌(71株)分离率。从不同部位分析,可培养真菌更容易从体表获得,而细菌则是从肠道部位获得。2)群落的组成和分布具有一定的普遍性和特殊性:真菌的曲霉属、青霉属普遍存在与大蜡螟的粪便、体表、丝这几个部位,细菌的肠球菌属、芽孢杆菌属则普遍存在于各个部位,且均为为优势属;而真菌的分子孢子属只分布于口器部位,细菌的赖氨酸芽孢杆菌属、嗜冷芽孢杆菌属只分布于丝的部位,且分离率都较低。3)群落多样性分析得出,真菌群落多样性最高的是饲料喂养大蜡螟,而细菌群落多样性最高是塑料驯化大蜡螟,;而就分离部位来说,真菌多样性体表部位最高,细菌多样性肠道最高。
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