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目的观察N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体2B亚型选择性拮抗剂Ro25-6981对胫骨癌痛大鼠脊髓后角胶质细胞、NR2B/JAK/SATA3通路及NR2B/NOS通路的影响。本研究采用测定机械痛与，免疫组化，real-time PCR，Western-blot，ELISA等方法，通过整体水平（免疫及感觉系统），细胞水平（小胶质细胞，星形胶质细胞和神经元细胞的激活状态）以及分子水平（NR2B，JAK2，GFAP及STAT3的表达，NOS，NO，IL-6及GLU的含量变化）得对话来探讨NMDAR2B亚基在骨癌痛中的作用及可能机制。方法采用Walker256乳腺癌细胞建立雌性SD大鼠胫骨癌痛模型。将大鼠随机分为4组，每组8只：假手术组（sham）、模型组(Model)、Ro25-6981预先给药组(R)及AG490组。鞘内注射Ro25-6981100μg或AG49050μg后，观察①Ro25-6981对大鼠脊髓背角NR2B，JAK表达；②对NOS，STAT3，OX42及GFAP的表达③痛阈④脊髓组织中NO及GLU含量的影响。结果①与假手术组相比，Ro25-6981组，AG490组和模型组术后7,14d时脊髓背角JAK及NR2B蛋白表达均升高(P<0.05)；与模型组比较，Ro25-6981组和AG490组术后7,14d时脊髓背角及NR2B蛋白表达降低(P <0.05)②与假手术组相比，Ro25-6981组，AG490组和模型组术后7,14d时脊髓背角NOS，STAT3，OX42及GFAP蛋白表达均升高(P<0.05);与模型组比较，Ro25-6981组和AG490组术后7,14d时脊髓背角NOS，STAT3，OX42及GFAP蛋白表达降低(P <0.05)，STAT3与GFAP有共表达；③痛阈：各组术前基础机械痛阈比较差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较，模型组术后7,14d时机械痛阈降低(P <0.05)，Ro25-6981组和AG490组术后7,14d时差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较，Ro25-6981组和AG490组术后7,14d时机械痛阈升高(P<0.05)。④与假手术组相比，Ro25-6981组，AG490组和模型组术后7,14d时脊髓组织中NO及GLU含量均升高(P<0.05);与模型组比较，Ro25-6981组和AG490组术后7,14d时脊髓组织中NO及GLU含量降低(P <0.05)。结论大鼠鞘内预先注射Ro25-6981，通过特异性地拮抗含NB2B亚基NMDA受体，产生明显的镇痛作用，可有效地预防和治疗胫骨癌性疼痛，其机制与抑制NMDA/JAK/STAT3通路及NMDA/NOS通路，进而减轻了癌性痛引起的脊髓背角星形胶质细胞及小胶质细胞的活化。