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目的:血管性痴呆(Vascular Dementia,Va D)是指各种脑血管疾病引起的智能障碍综合征,为老年期痴呆的常见类型之一。Va D的发病率逐年增加,已严重影响人类的生活质量。目前研究发现,脑缺血后引起海马结构中突触学习记忆环路损伤是血管性痴呆发病的重要环节。突触膜糖蛋白(Synaptophysin,SYP)是突触终末特异性标志物,通过影响突触可塑性,进而影响学习记忆能力。有研究表明大鼠SYP基因可被神经元限制性因子(neural restrictive silencer factor,NRSF)调控。NRSF作为一个转录调控因子,对神经发生及神经系统疾病起到重要作用。NRSF在不同生理病理状况下的表达水平及抑制的靶基因均存在差异。本实验试图探讨血管性痴呆大鼠海马结构NRSF和SYP的表达及相关性,为Va D预防及治疗提供新的靶点。方法:将2月龄雌性未孕Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成对照组和模型组。采用永久性结扎双侧颈总动脉(2VO)法建立血管性痴呆模型。利用Morris水迷宫检测两组大鼠学习记忆能力;采用实时荧光定量PCR检测两组大鼠海马NRSF和SYP m RNA的表达;利用蛋白质免疫印迹(Western blot)和荧光免疫组织化学法观察两组大鼠海马NRSF和SYP蛋白水平及分布;利用电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)来比较两组大鼠海马结构NRSF蛋白与SYP基因中NRSE序列的结合活性。结果:两组大鼠平均运动速度无明显变化(P>0.05);模型组大鼠5日平均逃避潜伏期与对照组相比显著增高(P<0.05);与对照组相比,模型组大鼠趋向式和直线式的总比例在第3、4和5日有明显差别(P<0.05),在第1和2日无明显差别(P>0.05);NRSF荧光免疫反应物在对照组大鼠海马结构中与细胞核共定位,在模型组大鼠海马结构中除了与细胞核共定位外,还散在于突起中,并且模型组的NRSF荧光免疫反应物亮于对照组;模型组大鼠海马结构SYP荧光免疫反应物亮度弱于对照组,且阳性反应物都在细胞核外;模型组海马结构NRSF总蛋白和NRSF mRNA与对照组相比显著升高(P<0.05);模型组大鼠海马结构NRSF核质比高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组海马结构SYP蛋白和SYP m RNA较对照组显著降低(P<0.05);总NRSF蛋白水平和SYP m RNA之间呈负相关(r2=-0.546,P<0.05),核NRSF蛋白与SYP m RNA之间也呈负相关(r2=-0.825,P<0.05);EMSA结果显示模型组NRSF与NRSE结合活性高于对照组,且具有统计学意义(P<0.05)。结论:永久性结扎双侧颈总动脉大鼠海马结构NRSF蛋白和m RNA增高,而SYP蛋白和m RNA下降;NRSF蛋白与SYP m RNA呈负相关。