本研究以新鲜牦牛血为原料,运用单因素、正交试验设计、响应面分析法对氯化血红素的提取、纯化工艺进行了优化;运用酸碱纯化法对氯化血红素进行了分离纯化,并对提取产品结构进行了研究。结果如下:1.木瓜蛋白酶酶解牦牛血红蛋白制备氯化血红素最佳工艺条件为;酶解温度55℃,酶解时间94min,pH8.0酶添加量0.08g,在此条件下氯化血红素浓度为6.43μg/mL。2.中性蛋白酶酶解牦牛血红蛋白制备氯化血红素最佳工艺条件为;酶解温度51℃、酶解时间110min、pH7.5、酶添加量0.09g,在此条件下氯化血红素含量为5.87μg/mL。3.复合蛋白酶酶解牦牛血红蛋白制备氯化血红素最佳工艺条件为;木瓜蛋白酶(4:6)中性蛋白酶,酶解温度60℃,酶解时间105min,酶解pH8.0,在此条件下氯化血红素含量为6.76μg/mL。4.氯化血红素产物纯化条件为;NaOH浓度为0.5mol/L、pH为4.0、酸化静置时间为10min,在此条件下氯化血红素纯度为87.03%。5.原子吸收光谱法定量测得氯化血红素实际含量为41.23%,铁元素含量为0.2631g/g。6.红外波谱、质谱分析对提取产品定性分析与Sigma公司标准品在相对分子质量(MW)及元素构成、特征官能团、表观颜色相一致。综上所述,木瓜蛋白酶与中性蛋白酶复配取牦牛氯化血红素的方法优于单酶提取法,通过酸碱纯化法可得到高纯度的氯化血红素,该产物铁含量高,结构稳定,牦牛血液有潜力成为氯化血红素提取的重要来源。