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目的：天然植物药IHA-01具有明显的抗肿瘤效应,本文通过研究IHA-01对肿瘤细胞微管的分子作用及其对体外猪脑微管蛋白聚合、解聚的影响来研究IHA-01对微管的作用,探讨该药可能的抗肿瘤机制,为其开发为候选抗肿瘤天然药物提供依据。方法：1、应用MTT比色法检测不同浓度和不同时间作用时间IHA-01对肺癌细胞株GLC的增殖及活力的影响；流式细胞仪检测不同浓度IHA-01作用后对肺癌细胞株GLC细胞周期的作用：微管蛋白特异性免疫荧光抗体染色技术及western blot检测IHA-01对肺癌细胞株GLC微管的影响。2、通过在体外对温度进行两次循环调控,运用高速离心机从新鲜猪脑中提取纯化出微管蛋白,体外建立微管蛋白亚单位聚合-解聚平衡系统,在此平衡系统中加入不同浓度的IHA-01,通过测量其吸光度值的变化来进一步证明IHA-01对微管体外聚合-解聚的影响。结果：浓度为2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L、32μmol/L的IHA-01作用24h、48h后GLC细胞的增殖受到明显抑制,且抑制率呈浓度依赖性;浓度为4μmol/L、8μmol/L的IHA-01作用后细胞周期发生Go/G1期阻滞(63.40±1.41)%、(75.02±2.35)%而使其无法向S期过渡,与正常对照组(49.66±1.34)%相比差异具有统计学意义(P<0.05)；免疫荧光染色显示浓度为4μmol/L的IHA-01作用24h后细胞骨架微管结构发生改变,表现为微管呈环状聚集在细胞核周围,胞质微管减少；western blot技术检测结果显示4μmol/L、8μmol/L的IHA-01作用24后细胞微管蛋白的表达量显著降低。通过微管蛋白亚单位体外聚合-解聚平衡系统发现浓度为2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L的IHA-01可抑制37℃温浴过程中微管蛋白吸光度值的升高,随着药物浓度的增加其最大吸光度值由正常对照组的0.26分别降为0.158、0.132、0.098,提示随着药物浓度的增加其对微管聚合的抑制程度增加。结论：IHA-01能抑制肿瘤细胞的细胞周期,并能抑制肿瘤细胞内微管的组装聚合及其微管蛋白的表达,且能抑制微管蛋白的体外聚合。IHA-01对微管的聚合抑制作用可能是其抗肿瘤机制之一。