氧化苦参碱对溃疡性结肠炎大鼠模型中TLR9通路的影响及其对脂质过氧化损伤的改善作用

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目的:本实验通过研究氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)对溃疡性结肠炎(UlcerativeColitis,UC)大鼠模型中TLR9/Myd88/NF-κB通路中各因子表达水平和结肠组织中SOD、MDA表达水平的影响,探讨OMT对TLR9通路的抑制作用及其在抗脂质过氧化损伤中的作用,以期阐明其抗炎抗氧化机制,为UC的治疗提供更多的药物选择。材料和方法:选取SPF级SD大鼠,雄性,体重(250±20)g,共75只,随机分为模型组、OMT组、美沙拉嗪组、OMT+美沙拉嗪组、空白对照组5组,每组15只。大鼠禁食不禁水24小时后予以麻醉,硅胶管插入肛门8厘米处,注入三硝基苯磺酸(TNBS,100mg/kg)+乙醇,造模后正常供应饮食,第2天起空白对照组及模型组给予蒸馏水灌胃,其余各组给予相应药物灌胃,1周后每组各取3只大鼠结肠组织进行大体形态学及组织学观察,2周后剩余全部大鼠杀取结肠组织,应用RT-PCR方法检测各组TLR9、Myd88、NF-κB mRNA的表达水平,应用黄嘌呤氧化酶法及TBA法检测各组结肠组织中SOD、MDA的含量。结果:1、病理结果:模型组大鼠结肠标本表现为肠粘膜充血、水肿、糜烂、坏死、肠壁增厚、溃疡形成,肠腔狭窄。光镜下可见粘膜局灶糜烂和溃疡,大量中性粒细胞浸润,腺体破坏,结构紊乱。用药各组大鼠结肠标本表现较模型组明显减轻,以充血水肿为主,溃疡较小且较浅表,光镜下粘膜层、粘膜下层以炎性渗出为主,中性粒细胞浸润程度轻,腺体增生较活跃。空白对照组结肠标本肉眼观察粘膜纹理清晰,无充血水肿及溃疡形成,光镜下见粘膜结构完整,腺体排列整齐清晰,少量炎细胞浸润。2、RT-PCR结果:模型组结肠组织中TLR9、Myd88、NF-κB mRNA表达水平较其他各组高,(p<0.01),OMT+美沙拉嗪组中TLR9、Myd88、NF-κB mRNA较OMT组和美沙拉嗪组低表达,(p <0.05),OMT组及美沙拉嗪组两组之间表达水平无统计学差异(p>0.05)。3、脂质过氧化损伤指标检测结果:模型组结肠组织中SOD活力最低,MDA含量最高,与其他各组相比差异具有统计学意义(p<0.01),OMT+美沙拉嗪组标本中SOD水平较OMT组及美沙拉嗪组高表达,MDA水平较OMT组及美沙拉嗪组低表达,差异具有统计学意义(p<0.01),OMT组及美沙拉嗪组两组之间SOD及MDA水平相比较p>0.05,差异无明显统计学意义。结论:1、OMT对UC大鼠结肠组织中TLR9、Myd88、NF-κB mRNA的表达具有显著的抑制作用,OMT联合美沙拉嗪应用比单用OMT或美沙拉嗪抑制作用更强。2、OMT能提高UC大鼠结肠组织中SOD的活力,降低MDA的表达水平,OMT与美沙拉嗪联合应用效果比单用OMT或美沙拉嗪更明显。
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