LncRNA-CAHM和抑癌基因QKI及其编码蛋白在胃癌中的表达及意义

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目的:长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200nt、不编码蛋白的RNA。近年来研究表明,lncRNA不仅参与多种生物学进程及扮演多种角色(如剪接、转录干扰、转录后调控、基因组印迹、染色质修饰、细胞周期调控、表观遗传学调控、免疫监视等),而且广泛参与机体的生理和病理过程,与人类疾病的发生、发展和防治都有着密切联系。异常的lncRNA表达能够导致包括肿瘤在内的多种疾病,尽管具体的机制尚不清楚,但在不同的癌肿中,许多lncRNA扮演着双重角色,即致癌及抑癌。  DNA甲基化是一种表观遗传修饰。其模式改变,尤其是某些抑癌基因局部甲基化水平的异常增加,在肿瘤的发生和发展过程中起到了不容忽视的作用。有研究报道,CAHM基因在结直肠癌中出现频繁过甲基化且其表达通常下调。抑癌基因QKI与CAHM基因毗邻且位于下游,在结直肠癌中低表达。近年来对QKI的研究发现,QKI可以通过调节细胞周期,促进细胞分化等多方面抑制肿瘤细胞的恶性表型。抑癌基因QKI在胃癌中的研究较少,其编码蛋白可以抑制胃癌的发生和发展。迄今,CAHM参与肿瘤发生、发展的机制仍不十分明确,在胃癌中的研究尚未见报道,与QKI基因编码蛋白的相互作用尚不清楚。  本研究拟观察lncRNA-CAHM和抑癌基因QKI及其编码蛋白在胃癌中的表达,评价二者之间的关联性及其与胃癌临床病理因素的关系。检测CAHM基因在胃癌组织中的甲基化水平,探讨CAHM与QKI基因之间可能的作用机制。  方法:1.采用Real-Time PCR法评估人胃癌组织中lncRNA CAHM、QKI mRNA表达情况。2.采用Western blot方法检测胃癌及其配对非癌胃粘膜组织中QKI基因编码蛋白的表达情况。3.采用甲基化特异性PCR法检测CAHM基因的甲基化状态。4.本研究所获得的数据均使用SPSS19.0软件分析,计数资料采用行×列表的x2检验或Fisher精确检验,相关系数用Pearson系数。检验水平α=0.05。  结果:1.qRT-PCR结果显示,与配对非癌胃粘膜组织相比,lncRNA CAHM在胃癌组织中的表达显著下调,lncRNA CAHM表达与胃癌胃壁内浸润深度密切相关,P<0.001;QKI mRNA在胃癌组织中的表达显著下调,且与胃癌大体分型(Borrmann分型)密切相关,P<0.001。Pearson相关性分析结果显示,胃癌中lncRNA CAHM和QKI mRNA表达呈正相关(r=0.277,P<0.001)。2.Western Blot检测结果显示,在胃癌组织中QKI基因编码蛋白表达显著下调(P<0.001)。3.甲基化特异性PCR检测结果显示,在胃癌组织中CAHM基因呈高甲基化状态。  结论:1.人胃癌组织中lncRNA CAHM与抑癌基因QKI mRNA表达显著低于配对非癌胃粘膜组织,LncRNA CAHM表达与胃癌胃壁内浸润深度密切相关;QKImRNA表达与胃癌大体分型(Borrmann分型)密切相关,提示CAHM及QKI可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用。2.QKI基因编码蛋白在胃癌组织中表达显著低于配对非癌胃粘膜组织,与QKI mRNA的表达趋势一致。3.胃癌组织中lncRNACAHM与其毗邻的抑癌基因QKI mRNA表达呈正相关,胃癌中CAHM基因呈高甲基化状态,提示lncRNA CAHM基因的高甲基化状态可能通过诱导QKI基因共同过甲基化进而影响QKI基因及其编码蛋白的表达,其相关分子机制需进一步深入研究。
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