樟芝液态发酵及产物对肿瘤细胞增殖影响

来源 :齐鲁工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yuany06
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樟芝是原产自我国宝岛台湾的一种药食两用的真菌,现代医学研究证实樟芝及其提取获得的生物活性成分具有抑制肿瘤、灭杀病毒、抗炎解毒、抗氧化及保护肝脏的生理作用。其活性成分主要为三萜类化合物和多糖等。研究证实樟芝三萜类化合物具有抗肿瘤、解毒和肝脏保护活性;樟芝多糖具备机体免疫调节活性和抗病毒活性。野生樟芝生长缓慢,产量极低。首先本文系统研究了樟芝液态发酵工艺。论文通过单因素实验和正交实验结合优化液体发酵培养基。论文探讨了多种碳源和氮源物质对樟芝的深层液体发酵后菌丝体、总多糖含量三和萜含量的影响,同时对培养条件如发酵温度、发酵持续时间、搅拌机转速和pH值等因素进行了系统探讨。樟芝液态发酵培养采用玉米面为碳源、麸皮为有机氮源、无机盐为镁离子,最佳发酵条件为时间14天、pH4、溶氧20%、温度28℃。根据正交实验可知有利于樟芝菌丝体、多糖最佳得率的培养基组合为A3B3C2D1,即麸皮为0.4%,玉米面为3%,KH2PO4为0.25%,MgSO4为0.15%。本文用酶解法和超声法结合的手段对樟芝菌丝体中有效成分进行了提取。分析表明经在pH值5.5酸碱度下采用2%浓度的纤维素酶经过2h酶解可以获取最大量的樟芝三萜;采用1:30(m/V)的固液比例在温度55℃和超声功率120W条件下持续35min,再经三倍量无水乙醇反复醇析处理,可以得到最大的樟芝多糖收率。本文用SRB法研究了樟芝对人肝癌细胞HepG2增殖的影响。结果表明,樟芝能显著抑制HepG2细胞的增殖。15-300μg/mL浓度的提取物对HepG2细胞增殖都能产生抑制。本文探讨了樟芝功能口服液的试制及配方。按樟芝提取物2%,果葡糖4%,β-环状糊精0.35%,低聚木糖2%,CMC-Na 0.10%、黄原胶0.04%、海藻酸钠0.06%进行调配,用NaHCO3调节pH 7.08.0,121℃灭菌10min,得到的樟芝口服液。综上,本论文探讨樟芝深层液体发酵技术以生产富含三萜类化合物的樟芝菌丝体,同时研究了三萜和多糖两种功能成分的提取方法。在此基础上,本文采用人肝癌细胞HepG2为模型,检测提取物对肿瘤细胞增殖的影响,最终以樟芝提取物为主要原料,试制抗肿瘤口服液产品。
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