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目的:通过本实验观察全反式维甲酸(Alltrans Retinoic Acid,ATRA)、奈达铂(Nedaplatin,NDP)及其两药联合应用对人肝癌细胞株Huh-7增殖与凋亡的影响,探讨本实验中化疗药物联合应用的相互作用。
方法:
通过选取不同的实验浓度如下,ATRA分设10-6、10-5、10-4 mol/L三组、NDP设1、2、5mg/L三组,随后通过预实验筛选出ATRA10-5mol/L联合不同浓度NDP(1、2、5mg/L)分别作用于肝癌Huh-7细胞24、48、72h；另外,将ATRA(10-5mol/L)+NDP(1mg/L)作为联合处理药物组作用于肝癌Huh-7细胞24h、48h、72h；应用医用倒置显微镜观察实验前后HUh-7细胞的形态学变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察ATRA、NDP及其两药联合应用对肝癌Huh-7细胞增殖的影响；同时采用流式细胞仪分析其对肝癌Huh-7细胞凋亡率的影响。
结果:
实验中不同浓度的全反式维甲酸ATRA(10-6、10-5、10-4 mol/L)和奈达铂NDP(1、2、5mg/L)单独作用于肝癌Huh-7细胞均有明显的抑制作用,且该作用随时间的延长、浓度的增高也渐增强；ATRA与NDP两药联合应用于HUh-7细胞后表现为协同作用,联合用药组与单药组相比,P<0.01。用流式细胞仪进行凋亡率检测,结果显示:ATRA处理HUh-7细胞48h后的凋亡率为:对照组0.82±0.15％,ATRA(10-6mol/L)组31.9±1.91％,ATRA(10-5mol/L)组42.57±1.03％,实验组与对照组比较(P<0.05)；NDP单药处理48h后,对照组为0.34±0.07％,药物组即1、2、5mg/L凋亡率分别为28.49±0.6％、38.53±0.7％、46.6±1.1％；ATRA、NDP两药联合作用48 h后,对照组为0.82％±0.15％,NDP1 mg/L组为28.49％±0.6％,ATRA10-5mol/L组为42.57％±1.03％,ATRA10-5mol/L+NDP1mg/L联合作用组为55.35％±1.30％,与单药比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。
结论:
全反式维甲酸ATRA与奈达铂NDP对人肝癌Huh-7细胞株均有抑制增殖和诱导凋亡的作用,且联合用药组与单药组比较,全反式维甲酸ATRA与奈达铂NDP两药联合应用于肝癌Huh-7细胞,具有明显协同作用。