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目的:双酚A(bisphenol A,BPA;学名2,2二丙烷)是一种常见的环境内分泌干扰物,可通过扰乱人体或生物体内自身激素的合成、分泌、转运及代谢等过程从而对人体的内分泌、神经、生殖和免疫系统等产生影响。研究指出,双酚A对发育中的中枢神经系统神经元起类似雌激素的作用,参与了神经元的生长、发育、成熟从而影响了神经元之间的连接,进而导致了一系列神经系统相关的症状。然而其中的剂量-效应关系目前尚无确切一致的结论,而孕期母体双酚A暴露的研究主要集中在海马及甲状腺等脏器,其中对小脑神经元影响的研究尚未见明确的报道,本实验模拟自然接触环境,采用经水口服建立妊娠期不同浓度BPA暴露模型,通过神经发育行为学、免疫组化及Westernblot等方法探究母体双酚A暴露是否影响了子鼠小脑神经元的发育及其相关机制。方法:实验共分4组,实验动物为SD大鼠(每组10只,其中高剂量组11只),每组分别给予双酚A剂量为0、0.5、5.0、50mg/kg·day,其中对照组给予等量双蒸水。暴露时间为自确认大鼠怀孕至分娩,每天称量孕鼠体重,计算所需双酚A量。仔鼠出生后在相应时间进行平面翻正、负趋地性和旋转杆测试;免疫组化检测仔鼠小脑组织神经元树突特异性标志物微管相关蛋白MAP2表达;Westernblot检测小脑神经元中细胞骨架蛋白F-actin、G-actin的表达,了解其表达情况;检测肌动蛋白结合蛋白:脑发育调节蛋白Drebrin、丝切蛋白Cofilin及其磷酸化状态P-cofilin的表达;结果:在平面翻正、负趋地性检测中:与对照组相比,各剂量组达标所需时间(s)差异虽无统计学差异,但用时均延长,且呈现线性关系,即暴露剂量越高相应达标时间越长,各暴露剂量组组内雌雄比较差异无统计学意义。在旋转杆测试中:匀速时与对照组相比,暴露剂量组停留时间均大于对照组;但是匀加速时,各剂量组停留时间均缩短,并呈现出剂量-效应关系,各暴露剂量组组内雌雄比较差异无统计学意义。免疫组化分析:在各时间点,各暴露剂量组组间比较MAP2表达有统计学意义(P=0.047,P=0.001,P=0.017)。进一步组间多重比较,在子鼠PND7日龄,高剂量暴露组与对照组及低剂量暴露组相比MAP2表达均明显降低(P=0.013,P=0.021),差异有统计学意义。在子鼠PND14日龄,与对照组相比,各暴露剂量组MAP2表达均明显降低(P=0.001,P=0.046,P=0.000),差异有统计学意义;高剂量暴露组MAP2表达明显低于中剂量暴露组(P=0.035),差异有统计学意义。在子鼠PND21日龄时高、中暴露剂量组MAP2表达明显低于对照组(P=0.045、P=0.003),差异有统计学意义;高暴露剂量组MAP2表达明显低于低剂量暴露组(P=0.034)差异有统计学意义。在子鼠PND7及21日龄,中剂量暴露组雌性子鼠MAP2表达明显高于雄性(P=0.006,P=0.021,P=0.042);在子鼠PND14日龄,雌性子鼠MAP2表达明显低于雄性(P=0.021)。Westernblot:与对照组相比,各剂量暴露组F-actin表达呈下降趋势,而G-actin基本不变;与对照组相化,各剂量暴露组cofilin表达均升高,而Drebrin、p-cofilin表达下降(P<0.05),差异有统计学意义。结论:1:母体双酚A暴露对子鼠的平衡、运动、协调和感觉等基本行为功能产生不良影响;2:母体双酚A暴露对子鼠小脑神经元树突早期发育产生不良作用,并在一定水平上呈现出剂量依赖性;3:母体双酚A暴露影响了子鼠小脑神经元细胞骨架蛋白的聚合状态,影响了肌动蛋白结合蛋白的表达水平。4:母体双酚A暴露的子鼠小脑神经元细胞骨架蛋白的聚合状态改变可能与肌动蛋白结合蛋白的表达水平改变有关;