【摘 要】
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[目的]:观察5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的人卵巢癌细胞系A2780、OVCAR3生长的影响及RASSFIA基因甲基化状态、在mRNA及蛋白水平表达的影响。[方法]:卵巢癌细胞系
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[目的]:观察5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的人卵巢癌细胞系A2780、OVCAR3生长的影响及RASSFIA基因甲基化状态、在mRNA及蛋白水平表达的影响。[方法]:卵巢癌细胞系A2780、OVCAR3经不同浓度5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-cdR)处理后,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印记(WesternBlot)检测其在mRNA和蛋白质水平的表达变化;同时MTT法观察卵巢癌细胞增殖能力的改变,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测药物处理前后的RASSF1A的甲基化状态。[结果]:人卵巢癌细胞A2780、OVCAR3经药物处理后,与对照组比较,5-氮杂-2’-脱氧胞苷0.5、5、50umol/l均能明显抑制肿瘤细胞生长,随5-氮杂-2’-脱氧胞苷浓度增加,细胞生长速率下降;对照组细胞A2780、OVCAR3均可见RASSFIAmRNA及蛋白水平均有表达,但表达较弱;经药物处理后的细胞见RASSFIA mRNA的表达较前增强,并随着药物浓度的增高表达增强;对照组细胞A2780、OVCAR3均可见RASSFIA启动子区发生了明显的甲基化,经药物处理后细胞RASSFIA甲基化状态出现逆转。[结论]:5-氮杂2’-脱氧胞苷可改变抑癌基因RASSFIA启动子甲基化状态,使其重新表达,从而抑制卵巢癌细胞系A2780、OVCAR3的生长,并促进其凋亡。
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