【摘 要】
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该文内容包括如下几个方面:1.大鼠脑突触体的制备及其形态和活性研究;2.正常、缺氧、缺糖和缺血触体模型的建立;3.缺氧和/或缺糖及MK801、硝苯地平对突触体内游离钙浓度和氨
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该文内容包括如下几个方面:1.大鼠脑突触体的制备及其形态和活性研究;2.正常、缺氧、缺糖和缺血触体模型的建立;3.缺氧和/或缺糖及MK801、硝苯地平对突触体内游离钙浓度和氨基酸(Asp,Glu,Gly,Tau,GABA)释放量的影响.以低浓度(0.3及0.8mol/L)蔗糖溶液为介质,在低离心力下制备突触体.以电镜观察和测定乳酸脱氢酶活性检测突触体形态结构的完整性,以高钾刺激后突触体内游离钙浓度和氨基酸释放量变化为指标判断其生物活性.通过除去培养介质中氧和/或葡萄糖并在37℃温育60分钟,造成突触体缺氧和/或缺糖.结果表明,该实验制备触体在正常、缺氧、缺糖或缺血条件下温育60min后,形态结构是完整的,在各种条件下温育期间无严重的膜损伤.50mmol/L KCl引起正常、缺氧、缺糖、缺氧缺糖突触体内游离钙浓度及氨基酸释放量显著增加,表明突触体具有较强的生物活性.缺氧与正常比较,静息及去极状态突触体内游离钙浓度略有增高,但无显著性;缺糖引起静息和去极状态[Ca<2+>]<,1>显著高于正常突触体(p<0.01),缺氧缺糖则引起[Ca<2+>]<,1>更大程度的升高.缺糖引起突触体氨基酸释放量显著增加,其作用也大于缺氧.这些差异提示,缺氧与缺糖在缺血性脑损伤中可能起着不同的作用.MK801和硝苯地平(10<-4>mol/L)使静息和去极状态缺氧缺糖突触体内游离钙浓度显著下降,使氨基酸释放量也显著减少.结论,该实验制备突触体方法具有简便、快速的特点.所建立的正常、缺氧、缺糖或缺血模型,能够分别反应出各因素对突触体代谢的影响,并能表现出药物的作用效果,获得与在体研究近似的结果.这些模型分别用于研究脑缺氧、缺糖或缺血性神经元损伤机制及寻找脑保护剂,是有用的模型系统.
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