苦瓜为葫芦科苦瓜属植物,是一种“药食同源”的功能食品的原料,素有“药用蔬菜”之称。“中药大辞典”等记载苦瓜有清火明目、解毒、降血糖、滋养、益气的功效[1]。人们研究也发现,苦瓜原汁、苦瓜的水提取物等具有抗菌、调节和提高机体免疫力、抗肿瘤、抑制艾滋病的表面活性等作用[2]。苦瓜成分很复杂,富含水分、多糖,糖苷和大量维生素等。目前,国内外对苦瓜的研究主要集中在苦瓜多肽及皂苷的降血糖,抗氧化和免疫性方面,而对苦瓜中其他未明确的降糖活性成分,比如含量较多的多糖类则研究相对较少,并且所用的多糖大多是未经纯化的粗多糖,苦瓜的来源不清,以及苦瓜多糖的作用机理等不全面,本文对苦瓜多糖的提取、纯化进行深入研究,并且用自己提取的苦瓜多糖根据小鼠的降血糖特性设计实验,通过实验来验证苦瓜多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用和胰岛素水平的影响,旨在开发苦瓜多糖的提取和药效机制,目前获得以下主要的研究结果。1.水提法提取苦瓜多糖,参考现有的提取技术,改进苦瓜多糖的提取方法和优化工艺来增加苦瓜多糖的提取率和苦瓜多糖的百分含量。根据苦瓜多糖的溶解性和具体成分分析设计实验步骤,确定最佳的提取方法,结果表明：采用果胶酶和纤维素酶的双酶水解法提取率相对较好,优化的最佳工艺为：时间为1小时、水料比为10：1、浸提温度为80℃,此时提取率为3.3%,多糖含量为23.2%,比热水提取法、超声波提取法、纤维素酶提取法分别提高了9.80%,15.3%和9.5%。2.在选择好方法后进一步选择三种类型的苦瓜,短圆形苦瓜、长圆形苦瓜、条形苦瓜,确定哪一种苦瓜的苦瓜多糖的含量相对较多。结果表明；条形苦瓜较短圆形和长圆形苦瓜好,因此选择条形苦瓜。然后再将条形苦瓜进一步分类,分为白(老)条形苦瓜和青(嫩)条形苦瓜进行试验,结果表明白(老)条形苦瓜较青(嫩)条形苦瓜要好,所以最终确定最终选材为白(老)条形苦瓜。3.苦瓜多糖粗品的纯化和精制苦瓜多糖成分的鉴定。苦瓜多糖粗品的纯化主要分为两步：第一步初步纯化；方法是先将苦瓜多糖粗品80℃水浴溶解,离心得上清液,用Sevage法脱蛋白,H202法除色素,浓缩,流水透析,乙醇沉淀,冷冻干燥后得到初步纯化苦瓜多糖。第二步深度纯化；方法是将初步纯化的苦瓜多糖经DEAE-32禺子柱层析,用0.1mol/L NaCI溶液进行洗脱,收集相应峰位组分,浓缩后,蒸馏水透析,冷冻干燥得到的精制苦瓜多糖。精制苦瓜多糖成分的鉴定采用的方法是用红外色谱法和紫外色谱法确定苦瓜多糖的结构、相应的官能团以及与蛋白质结合的情况,然后将精制苦瓜多糖进行酸性水解,经薄层层析后,可初步确定其单糖组成,进一步将精制苦瓜多糖进行水解并乙酰化后用GC-MS法分析其单糖组成,确定苦瓜多糖中的主要成分和比例[3]。4.苦瓜多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用和胰岛素水平的影响,方法是用昆明小鼠以链脲佐菌素制备糖尿病模型并使用苦瓜多糖提取物进行治疗,在治疗过程中观察苦瓜多糖的降血糖作用和对胰岛素水平的影响。结果显示：与未用药的糖尿病小鼠相比,苦瓜多糖治疗组小鼠血糖显著降低,胰岛素水平明显上调,胰岛素抵抗指数显著升高,胰岛素敏感指标显著降低。[4]本文的创新点在于：(1)建立了苦瓜多糖的双酶水解法的提取苦瓜多糖的方法和条件,确定了提取苦瓜多糖的最佳苦瓜的来源；(2)通过选择合适的方法对苦瓜多糖进行纯化,并确定了苦瓜多糖的主要成分的组成、比例以及结构；(3)用提取的苦瓜多糖对糖尿病小鼠进行实验,确定了苦瓜多糖对糖尿病小鼠有明显的降血糖作用,影响胰岛素分泌,使胰岛素抵抗指数显著升高,胰岛素敏感指标显著降低。