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以H-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH 为序列的胸腺五肽(TP5)是胸腺生成素II(Thymopoietin II)中第32~36 位的氨基酸残基片段,它保留了胸腺生成素II原有的生物活性,对机体的免疫系统具有双向调节作用,现已作为药物投放市场。因此,本文采用固相法合成胸腺五肽,不仅具有很好的市场前景,而且可为建立多肽固相合成技术平台提供一定的理论支持。本文首先综述了一般肽类固相合成的方法和TP5 的合成策略、现有水平及存在的问题,针对性地研究了固相合成TP5 方法中的几个关键影响因素:(1)树脂的溶胀条件(2)第一个氨基酸与树脂的连接反应(3)第一步连接反应中树脂上氨基酸的光学纯度和含量分析(4)肽链延长过程中所使用的缩合试剂(5)产物的切割条件,最终建立了较为高效、廉价的TP5 合成工艺路线,并证明了优化的工艺路线用于大规模合成的可行性。总结和归纳全文工作,结论如下: 1. 通过比较树脂担载量的大小和不同溶胀试剂对树脂溶胀度的影响,发现当树脂的担载量增大或溶剂极性增大时,树脂的溶胀性反而减小。2. 第一个氨基酸与树脂连接反应是整个合成过程中最关键的反应,它的好坏直接关系到最终产品的产率和纯度。本文通过添加复合缩合剂、改变溶剂的极性及采用不同种类的树脂,将第一步氨基酸的连接率从原先的30%~40%提高到100%;同时从理论上详细论述了复合缩合剂和溶剂对反应过程的影响,并提出了加入催化剂的碳二亚胺(DCC 或DIC)法和2,6-二氯苯甲酰氯(DCB)法的可能的反应机理。3. 第一步连接反应带来的一些副产物(D 型酪氨酸和酪氨酸-酪氨酸二肽)对最终产品的纯度和活性有很大的影响。通过建立副产物含量的液相分析方法,直观地比较和量化了不同的反应条件对氨基酸光学纯度和氨基酸含量的影响。4. 在肽链延长过程中,分别采用N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC)、N,N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)、氟磷酸-O-苯并三唑-N,N,N’,N’-四甲基脲(HBTU)和六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)四种缩合试剂合成TP5,实验证明:DIC 法在产率和纯度方面均能达到良好的水平。