【摘 要】
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杜仲是我国特有的传统珍稀药材,列为国家二级保护植物,以补肝肾、强筋骨、降血压、抗衰老、抗肿瘤等良好的功效获得广泛应用。要对杜仲资源进行保护的同时满足人们的用药需求
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杜仲是我国特有的传统珍稀药材,列为国家二级保护植物,以补肝肾、强筋骨、降血压、抗衰老、抗肿瘤等良好的功效获得广泛应用。要对杜仲资源进行保护的同时满足人们的用药需求,就需要利用现代生物技术对其进行开发。利用微生物发酵生产植物活性物质就是开发途径之一。内生真菌普遍存在于各种植物组织当中,长期与宿主共存,可能具有重要的生防作用,有产生与宿主相同或相似的生物活性物质的潜力。本研究从这方面出发,对杜仲资源开发作了探索。主要研究内容及结果有:
(1)从采自广东乐昌地区的杜仲的根、枝、叶、皮等组织分离内生真菌,各组织分离率依次为叶>根>枝>皮。研究了有效的表面消毒方法。根据分离得到的内生真菌形态及显微结构作了初步分类,再以ITS序列及18SrDNA序列测定结果比对分析,结合进化关系的研究,确定所分离的101株杜仲内生真菌中79株分属拟茎点霉、曲霉、刺盘孢霉、枝顶孢霉、镰孢霉、交链孢霉、瓶霉、壳针孢霉、内座壳菌9个属,以拟茎点霉、曲霉、刺盘孢霉最多。各组织中分布存在差异,根中主要为交链孢霉,叶、枝、皮中分别主要为拟茎点霉、曲霉、瓶霉。某些属仅存在于特定器官中,如交链孢霉、内座壳菌只分布于根中,瓶霉只存在于皮中。
(2)以杯碟法对部分杜仲内生真菌抑菌活性进行了研究,发现03(拟茎点霉)和05A(尖孢镰刀霉)对枯草芽孢杆菌有一定抑制作用,05A抑制力更强。通过对发酵产物进行HPLC测定,发现05A产绿原酸,发酵液中绿原酸含量1.04mg/L,05A、10(刺盘孢)、11B(镰孢菌)产桃叶珊瑚甙,发酵液中桃叶珊瑚甙浓度分别为17.2mg/L,32.3 mg/L,11.7mg/L。
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