NAD补救合成途径的关键酶NAMPT和NAPRT与结直肠癌患者预后的关系研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jh_fan88
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目的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是氧化还原反应中极为重要的辅助因子。烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)和烟酸酯磷酸核糖基转移酶(NAPRT)是NAD补救生物合成途径的关键酶,它们相互合成NAD,从而提供了NAD生物合成的主要来源。然而,NAMPT和NAPRT在结直肠癌(CRC)中的预后价值不清楚。方法收集临床病例,并通过5年随访获得临床病例资料。收集261例患者的手术后组织制作组织芯片,运用免疫组化技术研究了CRC癌组织和癌旁组织中NAMPT和NAPRT蛋白的表达。应用生物信息学的技术和方法搜集公共数据库资料,运用UALCAN、PROGgnesV2、cBioportal、TargetScan等在线分析软件分析NAPRT/NAMPT在CRC中的表达、突变、扩增、启动子甲基化等情况,以及对CRC预后的影响。对NAPRT/NAMPT的相关基因进行了KEGG通路分析。采用细胞实验,PCR,WesternBlot,CCK-8,Tanswell等方法,研究了NAMPT在CRC体外的功能。结果我们发现,NAPRT和NAMPT在CRC组织中高表达,NAPRT或NAMPT的高表达与CRC中的血管浸润、浸润深度和晚期TNM分期有关。NAPRT或NAMPT的高表达预示了CRC患者较短的总体生存期和无病生存时间。此外,NAMPT和NAPRT在CRC组织中的表达呈正相关关系。NAPRThigh/NAMPThigh患者生存时间最短。使用TCGA RNA测序数据,我们发现NAPRT的基因扩增,突变和甲基化比NAMPT更普遍。此外,与NAPRT相比,NAMPT基因可能被更多miRNA调控。通过KEGG通路分析发现,与NAPRT和NAMPT相关的基因经不同的途径中富集。在体外实验中我们发现NAMPT可促进CRC细胞的增殖和侵袭。结论本研究通过临床病理研究,生物信息学分析及细胞学研究发现NAPRT和NAMPT在CRC中高表达,NAMPT或NAPRT的高表达预示了CRC患者的不良预后,但二者的具体调节机制不同。
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