第一部分机械牵张预处理对骨髓间充质干细胞影响的研究目的:研究机械牵张（MS）对骨髓间充质干细胞（MSCs）形态和功能的影响。方法:将MSCs种植在胶原I包被的牵张板上,放置于细胞培养箱中培养,再采用应力加载系统对MSCs予以机械牵张干预,机械牵张幅度分别为10%和20%,机械牵张时间分别为24h和48h。实验分组:（1）未机械牵张组（Un-MS）,（2）10%机械牵张24h组（MS-10%-24h）,（3）10%机械牵张48h组（MS-10%-48h）,（4）20%机械牵张24h组（MS-20%-24h）,（5）20%机械牵张48h组（MS-20%-48h）。处理后留取细胞和上清液,检测方法与指标:（1）Wright-Giemsa染色观察MSCs形态;（2）流式细胞术检测MSCs细胞表面相关分子（CD90、CD29和CD45）表达;（3）ELISA检测MSCs细胞上清液中炎症因子（TNF-a,IL-6和IL-10）水平;（4）CCK-8法检测MSCs的增殖水平。结果:（1）Wright-Giemsa染色表明:与未机械牵张组相比,机械牵张组MSCs细胞形态扁平、纤细,细胞质物质减少,细胞膜皱褶和细胞浆萎缩。（2）流式细胞术检测表明:牵张组和未牵张组MSCs细胞表面均表达CD90和CD29,阳性率≥99%,无统计学差异（P>0.05）;同时CD44阳性率均≤5%,各组间无统计学差异（P>0.05）。（3）ELISA检测表明:与未机械牵张组相比,机械牵张组MSCs细胞上清液中TNF-a和IL-6水平明显升高（P<0.05）;但IL-10水平无明显差异（P>0.05）。（4）CCK-8法检测表明:与未牵张组相比,牵张组MSCs的细胞增殖显著增加（P<0.05）。结论:机械牵张明显改变MSCs细胞形态、增殖水平及细胞炎症因子的释放。第二部分机械牵张预处理骨髓间充质干细胞对ARDS肺微血管内皮细胞屏障的修复作用目的:研究MS预处理的MSCs对ARDS肺微血管内皮细胞屏障的修复作用。方法:采用应力加载系统对MSCs予以机械牵张干预,实验分组:（1）未机械牵张组（Untreated）,（2）10%机械牵张24h组（MS-10%-24h）,（3）10%机械牵张48h组（MS-10%-48h）,（4）20%机械牵张24h组（MS-20%-24h）,（5）20%机械牵张48h组（MS-20%-48h）。将人肺微血管内皮细胞（ECs）种植到Transwell小室上层,机械牵张预处理的MSCs种植到Transwell小室下层,与ECs共培养,脂多糖（LPS）加入小室上层,刺激6h。检测方法与指标:（1）FITC-葡聚糖法检测ECs细胞屏障通透性;（2）流式细胞术检测ECs凋亡水平;（3）Western blot法检测ECs细胞间黏附蛋白（VE-cadherin）和细胞间隙连接蛋白（Connexin43）的表达;（4）免疫荧光共聚焦法检测ECs细胞间黏附蛋白（VE-cadherin）的表达。结果:（1）LPS对ECs细胞屏障通透性的影响:与ECs组相比,LPS明显增加ECs细胞屏障通透性（P<0.05）,且LPS浓度越高,ECs细胞屏障通透性升高越明显（P<0.05）;（2）MSCs细胞浓度对ECs细胞屏障通透性的影响:与MSCs组相比,MSCs能明显改善LPS损伤的ECs细胞屏障通透性（P<0.05）;MSCs细胞浓度越高,对ECs细胞屏障通透性的改善作用越明显（P<0.05）;（3）机械牵张预处理MSCs对ECs细胞屏障通透性的影响:与LPS干预组相比,MS-20%-24h组MSCs对ECs细胞屏障通透性具有显著改善作用（P<0.05）;（4）机械牵张预处理MSCs对ECs凋亡的影响:与LPS干预组相比,MS-20%-24h组MSCs对ECs的凋亡具有显著改善作用（P<0.05）;（5）机械牵张预处理MSCs对ECs细胞间连接蛋白的影响:与LPS干预组相比,MS-20%-24h组MSCs能显著增加VE-Cadherin和Connexin43蛋白的表达（P<0.05）。结论:机械牵张预处理的MSCs改善ARDS肺微血管内皮细胞屏障通透性,减少肺微血管内皮细胞凋亡,增加ECs细胞间连接蛋白的表达。