目的研究线粒体ATP敏感性钾离子通道(mitoK_ATP通道)开放剂对持续高儿茶酚胺所致心肌损伤线粒体呼吸链（细胞色素C和细胞色素C氧化酶）的影响，探讨高儿茶酚所致心肌损伤的机制及mitoK_ATP通道开放剂的心肌保护机制，并为临床应用mitoK_ATP通道开放剂保护心肌提供理论依据。方法1．取生后1-3天的乳Wistar大鼠心室肌，采用酶消化法分离单个心肌细胞，结合差速贴壁法和5-溴脱氧尿苷（5-bromodeoxyuridine，BrdU）化学抑制法纯化心肌细胞。经倒置相差显微镜观察、HE染色、免疫组织化学染色、台盼蓝排斥实验等鉴定心肌细胞及心肌细胞的存活率和纯度。2．将培养72小时的心肌细胞随机分为5组：正常对照组（CON组）；NIC组：培养基中加入终浓度为1mmol／L的尼可地尔培养48小时；ISO组：在培养基中加入终浓度为10μmol／L的ISO，培养48小时；ISO+NIC组：在加入ISO前20分钟加入尼可地尔（1mmol／L），培养48小时；ISO+NIC+5-HD(mito K_ATP通道阻滞剂)组：在加入NIC和ISO前10分钟加入终浓度为500μmol／L的5-HD，培养48小时。3．匀浆、差速离心法分离心肌细胞线粒体，分光光度法测定培养基中、心肌细胞胞浆、线粒体细胞色素C含量及线粒体细胞色素C氧化酶活性，台盼蓝排斥实验测定心肌细胞存活率。结果1．心肌细胞线粒体细胞色素C氧化酶（COX）活性与CON组比较，NIC组线粒体COX活性无明显变化(13．249±2．217 vs 14．023±2．604μmolCyt-C·min^-1·mg^-1，P>0．05)；与CON组比较，ISO组COX活性明显降低(6．818±1．191vs 14．023±2．604μmolCyt-C·min^-1·mg^-1，P<0．05)；ISO+NIC组与CON组比较COX活性有所下降，但差异无统计学意义(11．965±1．641 vs 14．023±2.604μmolCyt-C·min^-1·mg^-1，P>0．05)；与ISO组比较，ISO+NIC组COX活性则明显升高(11．965±1．641 vs 6．818±1．191μmolCyt-C·min^-1·mg^-1，P<0．05)；与ISO+NIC组比较，ISO+NIC+5-HD组COX活性明显降低(11．965±1．641vs 9．176±0．949μmolCyt-C·min^-1·mg^-1，P<0．05)2．细胞外细胞色素C含量与CON组比较，NIC组细胞外细胞色素C含量无明显变化(5．421±1．329 vs 4．855±0．912μmol·L^-1，P>0．05)：ISO组(9．756±2．027μmol·L^-1)、ISO+NIC细(7.841±1．799μmol·L^-1)、ISO+NIC+5-HD组(10．364±1．629μmol·L^-1)均有不同程度升高（P<0．05）；与ISO组比较，ISO+NIC组细胞浆细胞色素C含量明显下降(7．841±1．799 vs 9．756±2．027μmol·L^-1，P<0．05)。3．细胞浆细胞色素C含量与CON组相比，NIC组细胞浆细胞色素C含量无明显变化(167．515±14．827 vs 164．1 73±21．644μmol·L^-1，P>0．05)；ISO组(275．895±25．391μmol·L^-1)、ISO+NIC组(202．725±33．427μmol·L^-1)、ISO+NIC+5-HD组(232．617±19．451μmol·L^-1)均有不同程度的升高（P<0．05）；ISO+NIC组与ISO组比较细胞浆Cyt-C含量明显下降(202．725±33．427 vs275．895±25．391μmol·L^-1，P<0．05)。4．线粒体细胞色素C含量与CON组比较，NIC组线粒体细胞色素C含量无明显变化(15．672±2．809 vs 16．558±2．051μmol·L^-1，P>0．05))；ISO组(8．513±1．772μmol·L^-1)和ISO+NIC+5-HD组(11．142±1．088 mol·L^-1)比较明显降低（P<0．05）；ISO+NIC组与ISO组比较明显升高(13．770±1．822 vs 8．513±1．772μmol·L^-1，P<0．05)。5．心肌细胞存活率与CON组比较，ISO组心肌细胞存活率明显降低（75．3vs 96．2％，P<0．005）；与ISO组比较，ISO+NIC组心肌细胞存活率明显升高（83．9vs 75．3％，P<0．005）；ISO+NIC+5HD组心肌细胞存活率显示较ISO+NIC组下降，但差异无统计学意义（78．7 vs 83．9％，P>0．005）；CON组与NIC组比较无明显差异（96．2 vs 93．2％，P>0．005）。结论1．高儿茶酚胺作用下，心肌细胞线粒体关键酶细胞色素C氧化酶活性降低，细胞色素C从线粒体释放到细胞浆和细胞外；2．高儿茶酚胺致线粒体功能障碍，心肌细胞存活率降低。3．K_ATP通道开放剂尼可地尔可以拮抗高儿茶酚胺的心肌毒性使mitoK_ATP通道开放，可以减少高儿茶酚胺引起的Cyt-C从线粒体释放和COX活性降低。提高心肌细胞存活率。mitoK_ATP通道在维持线粒体呼吸链完整性方面起作用。